Actinomycin D
2019-03-21 
MCE小分子
Actinomycin D 抑制 DNA 修复，IC50 为 0.42 μM。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
Actinomycin D分子量：1255.42
生物活性
体外
放线菌素D是DNA转录和复制的抑制剂。 放线菌素D通过抑制80nM的BrdU掺入显着降低血管平滑肌细胞（SMC）的增殖。 使用流式细胞分析进一步支持G1期阻滞。 放线菌素D非常有效，抑制浓度IC50为0.4nM，而致死剂量LD50为260μM。 增殖细胞核抗原（PCNA），粘着斑激酶（FAK）和Raf的蛋白表达水平均被放线菌素D抑制。细胞周期信号调节激酶（Erk）参与细胞周期停滞，发现放线菌素D增加。
体内
将含有80nM和80μM放线菌素D的pluronic凝胶局部施用以包围大鼠颈动脉外膜，新内膜的厚度显着减少（分别为45％和55％）。 放线菌素D和氟达拉滨组中的小鼠比对照组寿命显着更长，P值分别<0.001和0.007。 有趣的是，放线菌素D单次治疗总体生存率优于氟达拉滨（P = 0.026）
实验参考方法
激酶测定
将放线菌素D在30℃下与含有以下物质的反应混合物共孵育3小时：120mg HeLa细胞的全细胞提取物，70mM KCl，dGTP，dCTP，dATP和地高辛化-dUTP各0.4mM。 反应缓冲液含有40mM Hepes-KOH（pH 7.6），5mM MgCl 2,0.5mM二硫苏糖醇，2mM EGTA，10mM磷酸肌酸，50mg / mL磷酸肌酸和360mg / mL牛血清白蛋白。 在该反应过程中，识别DNA损伤并且切除的贴片被新合成的DNA片段替换。 在整个DNA合成中，掺入了地高辛化的dUMP。 通过三次洗涤终止DNA修复反应。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
小鼠
将原始Eμ-TCL1a转基因小鼠与C57BL / 6小鼠回交> 9代.C57BL / 6野生型小鼠植入来自Eμ-TCL-1转基因小鼠的肿瘤细胞。 通过从尾静脉采血并通过流式细胞术分析，在小鼠中常规检查外周血中CD5 + / CD19 +细胞的百分比。 当外周血中肿瘤细胞的百分比达到40-60％时，开始治疗。 每天通过腹膜内施用放线菌素D（0.06mg / kg，10天）。 注射。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
Actinomycin D分子量：1255.42
生物活性
体外
放线菌素D是DNA转录和复制的抑制剂。 放线菌素D通过抑制80nM的BrdU掺入显着降低血管平滑肌细胞（SMC）的增殖。 使用流式细胞分析进一步支持G1期阻滞。 放线菌素D非常有效，抑制浓度IC50为0.4nM，而致死剂量LD50为260μM。 增殖细胞核抗原（PCNA），粘着斑激酶（FAK）和Raf的蛋白表达水平均被放线菌素D抑制。细胞周期信号调节激酶（Erk）参与细胞周期停滞，发现放线菌素D增加。
体内
将含有80nM和80μM放线菌素D的pluronic凝胶局部施用以包围大鼠颈动脉外膜，新内膜的厚度显着减少（分别为45％和55％）。 放线菌素D和氟达拉滨组中的小鼠比对照组寿命显着更长，P值分别<0.001和0.007。 有趣的是，放线菌素D单次治疗总体生存率优于氟达拉滨（P = 0.026）
实验参考方法
激酶测定
将放线菌素D在30℃下与含有以下物质的反应混合物共孵育3小时：120mg HeLa细胞的全细胞提取物，70mM KCl，dGTP，dCTP，dATP和地高辛化-dUTP各0.4mM。 反应缓冲液含有40mM Hepes-KOH（pH 7.6），5mM MgCl 2,0.5mM二硫苏糖醇，2mM EGTA，10mM磷酸肌酸，50mg / mL磷酸肌酸和360mg / mL牛血清白蛋白。 在该反应过程中，识别DNA损伤并且切除的贴片被新合成的DNA片段替换。 在整个DNA合成中，掺入了地高辛化的dUMP。 通过三次洗涤终止DNA修复反应。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
小鼠
将原始Eμ-TCL1a转基因小鼠与C57BL / 6小鼠回交> 9代.C57BL / 6野生型小鼠植入来自Eμ-TCL-1转基因小鼠的肿瘤细胞。 通过从尾静脉采血并通过流式细胞术分析，在小鼠中常规检查外周血中CD5 + / CD19 +细胞的百分比。 当外周血中肿瘤细胞的百分比达到40-60％时，开始治疗。 每天通过腹膜内施用放线菌素D（0.06mg / kg，10天）。 注射。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
