Kaempferol
Kaempferol 在乳腺癌细胞中抑制雌激素受体 (estrogen receptor α) 表达,在胶质母细胞瘤细胞和肺癌细胞中,通过激活 MEK-MAPK 诱导细胞凋亡。
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Kaempferol的生物活性
体外
通过抑制Src激酶和下调NFκB途径,Kaempferol还通过抑制白细胞介素-4和环氧合酶2的表达而具有抗炎作用。山萘酚还可有效抑制卵巢癌细胞的血管生成和诱导细胞凋亡。Kaempferol是一种广泛分布于水果和蔬菜中的天然黄酮类化合物,前瞻性研究表明,几十年来,山奈酚的消费显着且显着降低了美国女护士患卵巢癌的风险。在24小时处理后,山奈酚在所有测试的3种卵巢癌细胞中引起显着和浓度依赖性的增殖抑制。在40μM或更高的治疗浓度下观察到这种抑制作用。山萘酚是一种黄酮类化合物,含有丰富的植物衍生食品和传统药物中使用的叶子。山奈酚显着抑制NADPH氧化酶活性。山萘酚通过直接结合的NADPH氧化酶降低活性氧(ROS)。Kaempferol通过降低CAMKII氧化来预防Ang II诱导的窦房结细胞死亡.10-20μMKaempferol剂量依赖性地抑制其在致敏RBL-2H3细胞中的释放。当将10-20μM山奈酚补充到DNP-BSA攻击的RBL-2H3细胞15分钟时,Syk和PLCγ的活化高度减弱。当将≥10μM山奈酚加入到DNP-BSA攻击的RBL-2H3细胞中60分钟时,COX2诱导减少。
体内
在BSA攻击的BALB / c小鼠的气道中证实COX2诱导。观察到未治疗的对照小鼠的气道中缺乏COX2。小鼠BSA吸入导致小鼠气道中COX2诱导增强(深褐色染色),通过口服山奈酚可逆转。在BSA攻击的小鼠中,观察到明显的杯状细胞增生和上皮增厚。当向BSA攻击的小鼠补充20mg / kg山奈酚时,上皮增厚完全消失。
Kaempferol的实验参考方法
激酶测定
将右心房或窦房结细胞在裂解缓冲液中匀浆,所述裂解缓冲液由(50mM Tris-HCl pH 7.5,100mM KCl,1mM乙二胺四乙酸,1mM乙二醇四乙酸,1mM二硫苏糖醇,0.1mM苯甲基磺酰氟,0.5mM组成)苯甲脒,20mg / L亮肽素,20mM焦磷酸钠,50mM NaF和50mMβ-甘油磷酸钠)和总蛋白含量通过Bradford测定法测定。Caspase-3活性由EnzChek Caspase-3 Assay Kit测定。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。
细胞分析
将卵巢癌细胞以2000个细胞/孔接种在96孔板中并孵育过夜,然后用0-160μM山奈酚处理24小时,一式三份。除去培养基,将板冷冻解冻以裂解细胞。向每个孔中加入含有5x SYBR Green I的200μL1×CyQUANT细胞裂解缓冲液,并在室温(RT)下孵育5分钟。将反应(50μL)转移至PCR条管,并使用实时Chromo4 PCR仪器在90℃下测量荧光信号。为了确保细胞增殖测定在细胞数的线性范围内进行,通过在96孔板中接种不同量的OVCAR-3细胞(基于用血细胞计数器计数)产生标准曲线,并测量基因组DNA丰度。过夜孵化后.
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。
Animal Administration
小鼠
将3周龄雄性BALB / c小鼠随机分配到4个治疗组,如下(每组n = 8)。(1)PBS致敏小鼠; (2)BSA致敏小鼠; (3)BSA致敏和10mg / kg Kaempferol给药的小鼠; (4)BSA致敏的和20mg / kg的山奈酚给药小鼠。给予小鼠商业小鼠饲料,其含有20.5%蛋白质,3.5%脂肪,8%纤维,8%灰分和0.5%磷,并允许随意获取食物和水。。在无特定病原体的条件下,将小鼠在23±1℃和50%±5%相对湿度下保持12小时光照和黑暗循环。在开始过敏实验之前,允许小鼠习惯其周围环境一周。所有实验小鼠的致敏性通过在第0天和第14天用30μLPBS中的20μgBSA和50μLInjectAlum皮下注射来进行。对照小鼠注射50μLPBS和50μL不含BSA的Imum Alum的组合。在第28,29和30天,只有对BSA敏感的实验小鼠被吸入5%BSA,而对照小鼠在连接到Medel气溶胶喷雾器的塑料室中用5%PBS攻击20分钟。在最后一次攻击后24小时处死所有小鼠。全血样本直接用于测量嗜酸性粒细胞的含量,嗜碱性粒细胞和中性粒细胞。将右肺储存在4%多聚甲醛中直至使用。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。