PI3K抑制剂靶向BKM120
2019-03-14 
MCE小分子
BKM120 是一种 pan-class I PI3K 抑制剂，作用于 p110α/p110β/p110δ/p110γ，IC50 分别为 52 nM/166 nM/116 nM/262 nM。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
体外
BKM120（BKM120）对I类PI3K表现出50-300nM的活性，包括最常见的p110α突变体。 此外，BKM120对III类和IV类PI3K的效力较低，其中分别观察到2,5，> 5和>25μM的生化活性抑制VPS34，mTOR，DNAPK和PI4K [1]。 BKM120以剂量和时间依赖性方式诱导多发性骨髓瘤（MM）细胞凋亡。 浓度≥10μM的BKM120在24小时时在所有测试的MM细胞系中诱导显着的细胞凋亡（与对照相比，P <0.05）。 因此，如果没有另外说明，则在以下实验中选择10μMBKM120和24小时处理。 BKM120处理在所有测试的MM细胞系中导致剂量依赖性生长抑制。 BKM120 IC50在测试的MM细胞中不同。 在24小时处理时，ARP-1，ARK和MM.1R的IC50在1和10μM之间，而MM.1S的IC50 <1μM，U266的IC50在10和100μM之间。 总之，BKM120处理以剂量和时间依赖性方式导致MM细胞生长抑制和凋亡[2]。
体内
在A2780异种移植肿瘤中，以3,10,30,60和100mg / kg口服给予BKM120（BKM120）导致pAKTSer473的剂量依赖性调节。 在3和10mg / kg时观察到pAKTSer473的部分抑制，并且在30,60或100mg / kg的剂量下分别观察到接近完全抑制。 pAKT的抑制（标准化为总AKT）跟踪血浆和肿瘤药物暴露[1]。 与对照小鼠相比，接受BKM120（每天每公斤5μM，持续15天）治疗的小鼠具有显着更小的肿瘤负荷，其以肿瘤体积（P <0.05）和循环人κ链的水平测量（P <0.05）。 ）。 此外，BKM120治疗显着延长荷瘤小鼠的存活率（P <0.05）
溶剂和溶解度
体外：
DMSO：≥100mg / mL（243.67 mM）
*“≥”表示可溶，但饱和度未知
体内：
1。逐个添加每种溶剂：10％DMSO 90％（20％SBE-β-CD在盐水中）
溶解度：≥2.5mg / mL（6.09 mM）; 明确解决方案
2。逐个加入每种溶剂：10％DMSO 90％玉米油
溶解度：≥2.5mg / mL（6.09 mM）; 明确解决方案
3。逐个添加每种溶剂：10％DMSO 40％PEG300 5％Tween-80 45％盐水
溶解度：≥2.5mg / mL（6.09 mM）; 明确解决方案
实验参考方法
激酶测定[1]
将待测试的BKM120溶解在DMSO中，并以每孔1.25μL直接分配到黑色384孔板中。 为了开始反应，在测定缓冲液（10mM Tris pH 7.5,5mM MgCl 2,20mM NaCl，1mM DTT和0.05％CHAPS）中加入25μL10nM PI3激酶和5μg/ mL 1-α-磷脂酰肌醇（PI） 在每个孔中加入25μL2μMATP的测定缓冲液。 进行反应直至约50％的ATP耗尽，然后通过加入25μL的KinaseGlo溶液终止反应。 将停止的反应温育5分钟，然后通过发光检测剩余的ATP [1]。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
细胞分析[1]
A2780细胞在补充有10％FBS的DMEM中培养。 L-谷氨酰胺，丙酮酸钠和抗生素。 将细胞以每孔1000个细胞的密度接种在相同的培养基中，每孔100μL进入黑壁透明底板并孵育3-5小时。 将在DMSO（20mM）中提供的BKM120进一步稀释到DMSO中（7.5μL的20mM BKM120在22.5μLDMSO中。充分混合，转移10μL至20μLDMSO，重复直至达到9个浓度）。 然后将稀释的BKM120溶液（2uL）加入细胞培养基（500μL）细胞培养基中。 将等体积的该溶液（100μL）加入到96孔板中的细胞中，并在37℃下孵育3天，并使用Cell Titer Glo进行显色。 使用Trilux [1]通过发光读数确定细胞增殖的抑制。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考
Animal Administration
小鼠[2]
使用六至八周龄的雌性严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠。 在右侧皮下接种SCID小鼠，将100万个ARP-1或MM.1S细胞悬浮于50μL磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。 在可触知的肿瘤发展（肿瘤直径≥5mm）后，??用腹膜内注射DMSO / PBS或BKM120（5μM/ kg /天）处理小鼠15天。 每5天测量肿瘤大小，并在同一时间收集血液样品。 通过测量肿瘤大小和检测循环的人κ链或λ链来评估肿瘤负荷。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考
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体外
BKM120（BKM120）对I类PI3K表现出50-300nM的活性，包括最常见的p110α突变体。 此外，BKM120对III类和IV类PI3K的效力较低，其中分别观察到2,5，> 5和>25μM的生化活性抑制VPS34，mTOR，DNAPK和PI4K [1]。 BKM120以剂量和时间依赖性方式诱导多发性骨髓瘤（MM）细胞凋亡。 浓度≥10μM的BKM120在24小时时在所有测试的MM细胞系中诱导显着的细胞凋亡（与对照相比，P <0.05）。 因此，如果没有另外说明，则在以下实验中选择10μMBKM120和24小时处理。 BKM120处理在所有测试的MM细胞系中导致剂量依赖性生长抑制。 BKM120 IC50在测试的MM细胞中不同。 在24小时处理时，ARP-1，ARK和MM.1R的IC50在1和10μM之间，而MM.1S的IC50 <1μM，U266的IC50在10和100μM之间。 总之，BKM120处理以剂量和时间依赖性方式导致MM细胞生长抑制和凋亡[2]。
体内
在A2780异种移植肿瘤中，以3,10,30,60和100mg / kg口服给予BKM120（BKM120）导致pAKTSer473的剂量依赖性调节。 在3和10mg / kg时观察到pAKTSer473的部分抑制，并且在30,60或100mg / kg的剂量下分别观察到接近完全抑制。 pAKT的抑制（标准化为总AKT）跟踪血浆和肿瘤药物暴露[1]。 与对照小鼠相比，接受BKM120（每天每公斤5μM，持续15天）治疗的小鼠具有显着更小的肿瘤负荷，其以肿瘤体积（P <0.05）和循环人κ链的水平测量（P <0.05）。 ）。 此外，BKM120治疗显着延长荷瘤小鼠的存活率（P <0.05）
溶剂和溶解度
体外：
DMSO：≥100mg / mL（243.67 mM）
*“≥”表示可溶，但饱和度未知
体内：
1。逐个添加每种溶剂：10％DMSO 90％（20％SBE-β-CD在盐水中）
溶解度：≥2.5mg / mL（6.09 mM）; 明确解决方案
2。逐个加入每种溶剂：10％DMSO 90％玉米油
溶解度：≥2.5mg / mL（6.09 mM）; 明确解决方案
3。逐个添加每种溶剂：10％DMSO 40％PEG300 5％Tween-80 45％盐水
溶解度：≥2.5mg / mL（6.09 mM）; 明确解决方案
实验参考方法
激酶测定[1]
将待测试的BKM120溶解在DMSO中，并以每孔1.25μL直接分配到黑色384孔板中。 为了开始反应，在测定缓冲液（10mM Tris pH 7.5,5mM MgCl 2,20mM NaCl，1mM DTT和0.05％CHAPS）中加入25μL10nM PI3激酶和5μg/ mL 1-α-磷脂酰肌醇（PI） 在每个孔中加入25μL2μMATP的测定缓冲液。 进行反应直至约50％的ATP耗尽，然后通过加入25μL的KinaseGlo溶液终止反应。 将停止的反应温育5分钟，然后通过发光检测剩余的ATP [1]。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
细胞分析[1]
A2780细胞在补充有10％FBS的DMEM中培养。 L-谷氨酰胺，丙酮酸钠和抗生素。 将细胞以每孔1000个细胞的密度接种在相同的培养基中，每孔100μL进入黑壁透明底板并孵育3-5小时。 将在DMSO（20mM）中提供的BKM120进一步稀释到DMSO中（7.5μL的20mM BKM120在22.5μLDMSO中。充分混合，转移10μL至20μLDMSO，重复直至达到9个浓度）。 然后将稀释的BKM120溶液（2uL）加入细胞培养基（500μL）细胞培养基中。 将等体积的该溶液（100μL）加入到96孔板中的细胞中，并在37℃下孵育3天，并使用Cell Titer Glo进行显色。 使用Trilux [1]通过发光读数确定细胞增殖的抑制。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考
Animal Administration
小鼠[2]
使用六至八周龄的雌性严重联合免疫缺陷（SCID）小鼠。 在右侧皮下接种SCID小鼠，将100万个ARP-1或MM.1S细胞悬浮于50μL磷酸盐缓冲盐水（PBS）中。 在可触知的肿瘤发展（肿瘤直径≥5mm）后，??用腹膜内注射DMSO / PBS或BKM120（5μM/ kg /天）处理小鼠15天。 每5天测量肿瘤大小，并在同一时间收集血液样品。 通过测量肿瘤大小和检测循环的人κ链或λ链来评估肿瘤负荷。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考
