Gemcitabine(DNA合成 抑制剂)
2019-03-14 
MCE小分子
Gemcitabine (NSC 613327;LY188011) 是一种 DNA合成 抑制剂，抑制 BxPC-3，Mia Paca-2，PANC-1，PL-45 和 AsPC-1细胞生长的 IC50 分别为 37.6, 42.9, 92.7, 89.3 和 131.4 nM。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
Gemcitabine生物活性
体外研究
MTS测定证明，15nM的吉西他滨，50μM的吲哚-3-甲醇（I3C）和该组合不影响hTERT-HPNE细胞活力。 然而，用15nM的吉西他滨，50μM的I3C和该组合治疗分别导致BxPC-3细胞31％，19％和72％的细胞死亡。
体内研究
治疗LSL-KrasG12D / +; LSL-Trp53R172H; 与安慰剂组相比，使用吉西他滨（50 mg / kg，ip）或组合DMAPT /吉西他滨的Pdx-1-Cre小鼠显着增加中位生存时间超过30天（254.5 [P = 0.015]或255天[ P = 0.018]分别为217.5天）[2]。 吉西他滨可通过大鼠气管内喷雾给药，无明显毒性，最大耐受剂量为4mg / kg，每周一次，持续9周。 在剂量为2,4和6mg / kg时，吉西他滨的毒性低于口服给药
Gemcitabine实验参考方法
细胞分析
将细胞（人胰腺细胞系，Mia PaCa-2，BxPC-3，AsPC-1，PANC-1，PL-45和正常胰腺导管上皮细胞，hTERT-HPNE细胞）接种到96孔板中（3000 细胞/孔）一式三份。 孵育过夜后，更换培养基并用I3C和/或NBMPR处理细胞24小时。 再次更换培养基，并在存在或不存在相同浓度的I3C和/或NBMPR的情况下，在含有不同浓度的吉西他滨的培养基中培养细胞48小时。 然后按照制造商的说明对细胞进行CellTiter 96 AQueous One Solution Cell Proliferation Assay（MTS）。 在加入20μLMTS试剂/孔后2小时测量490nm处的吸光度。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
小鼠
1个月大的时候，LSL-KrasG12D / +; LSL-Trp53R172H; 将Pdx-1-Cre小鼠随机分入治疗组（安慰剂，DMAPT，吉西他滨，DMAPT /吉西他滨）。 安慰剂（载体=羟丙基甲基纤维素，0.2％吐温80 [HPMT]）和DMAPT（HPMT中40mg / kg体重）通过每天一次口服洗胃施用。 每周两次通过腹膜内注射施用吉西他滨（PBS中50mg / kg体重）。 每周监测小鼠体重。 继续治疗直至小鼠出现嗜睡，腹胀或体重减轻的迹象，此时将其处死。 通过检测单个LoxP位点的存在，在小鼠胰腺中确认成功的切除 - 重组事件。
大鼠
该研究在80只雌性Wistar大鼠中进行，初始重量约为250g。 通过耳标识别动物并如下分组。 将40只大鼠分成5组，每组8只：4组通过气管内喷雾分别以2,4,6和8mg / kg的剂量肺组织给予吉西他滨（LD2，LD4，LD6，LD8组）和一组 接受0.9％盐水载体溶液（组LDv）的喷雾给药。 将剩余的40只大鼠分成5组，每组8只：4组分别通过管饲法分别以2,4,6和8mg / kg的剂量口服递送吉西他滨（OD2，OD4，OD6，OD8组）， 组通过管饲法接受相同体积的0.9％盐水（组ODv）。 该协议包括以1周为间隔的九个会话。 在两个疗程之间，将动物保持在标准实验室条件下，并在每个笼子中由四只动物的一组饲养，其中有垫料并且可以自由获得颗粒食物和自来水。 将笼子放置在与抽吸系统连接的封闭腔室中。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
Gemcitabine生物活性
体外研究
MTS测定证明，15nM的吉西他滨，50μM的吲哚-3-甲醇（I3C）和该组合不影响hTERT-HPNE细胞活力。 然而，用15nM的吉西他滨，50μM的I3C和该组合治疗分别导致BxPC-3细胞31％，19％和72％的细胞死亡。
体内研究
治疗LSL-KrasG12D / +; LSL-Trp53R172H; 与安慰剂组相比，使用吉西他滨（50 mg / kg，ip）或组合DMAPT /吉西他滨的Pdx-1-Cre小鼠显着增加中位生存时间超过30天（254.5 [P = 0.015]或255天[ P = 0.018]分别为217.5天）[2]。 吉西他滨可通过大鼠气管内喷雾给药，无明显毒性，最大耐受剂量为4mg / kg，每周一次，持续9周。 在剂量为2,4和6mg / kg时，吉西他滨的毒性低于口服给药
Gemcitabine实验参考方法
细胞分析
将细胞（人胰腺细胞系，Mia PaCa-2，BxPC-3，AsPC-1，PANC-1，PL-45和正常胰腺导管上皮细胞，hTERT-HPNE细胞）接种到96孔板中（3000 细胞/孔）一式三份。 孵育过夜后，更换培养基并用I3C和/或NBMPR处理细胞24小时。 再次更换培养基，并在存在或不存在相同浓度的I3C和/或NBMPR的情况下，在含有不同浓度的吉西他滨的培养基中培养细胞48小时。 然后按照制造商的说明对细胞进行CellTiter 96 AQueous One Solution Cell Proliferation Assay（MTS）。 在加入20μLMTS试剂/孔后2小时测量490nm处的吸光度。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
小鼠
1个月大的时候，LSL-KrasG12D / +; LSL-Trp53R172H; 将Pdx-1-Cre小鼠随机分入治疗组（安慰剂，DMAPT，吉西他滨，DMAPT /吉西他滨）。 安慰剂（载体=羟丙基甲基纤维素，0.2％吐温80 [HPMT]）和DMAPT（HPMT中40mg / kg体重）通过每天一次口服洗胃施用。 每周两次通过腹膜内注射施用吉西他滨（PBS中50mg / kg体重）。 每周监测小鼠体重。 继续治疗直至小鼠出现嗜睡，腹胀或体重减轻的迹象，此时将其处死。 通过检测单个LoxP位点的存在，在小鼠胰腺中确认成功的切除 - 重组事件。
大鼠
该研究在80只雌性Wistar大鼠中进行，初始重量约为250g。 通过耳标识别动物并如下分组。 将40只大鼠分成5组，每组8只：4组通过气管内喷雾分别以2,4,6和8mg / kg的剂量肺组织给予吉西他滨（LD2，LD4，LD6，LD8组）和一组 接受0.9％盐水载体溶液（组LDv）的喷雾给药。 将剩余的40只大鼠分成5组，每组8只：4组分别通过管饲法分别以2,4,6和8mg / kg的剂量口服递送吉西他滨（OD2，OD4，OD6，OD8组）， 组通过管饲法接受相同体积的0.9％盐水（组ODv）。 该协议包括以1周为间隔的九个会话。 在两个疗程之间，将动物保持在标准实验室条件下，并在每个笼子中由四只动物的一组饲养，其中有垫料并且可以自由获得颗粒食物和自来水。 将笼子放置在与抽吸系统连接的封闭腔室中。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
