Tacrolimus
2019-03-21 
MCE小分子
Tacrolimus是一种具有强效免疫抑制特性的大环内酯。 他克莫司与FK506结合蛋白 (FKBP) 结合形成复合物并抑制钙调神经磷酸酶 (calcineurin phosphatase)。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
生物活性
体外
他克莫司（FK506）抑制钙依赖性事件，例如IL-2基因转录，NO合酶活化，细胞脱粒和细胞凋亡。 他克莫司还通过与激素受体复合物中包含的FKBP结合来增强糖皮质激素和孕酮的作用，从而防止降解。 该试剂可以类似于CsA所证实的方式增强TGFβ-1基因的表达。 Tacrolimus抑制了响应T细胞受体结扎的T细胞增殖[1]。 用低浓度的他克莫司（FK506,10μg/ L）治疗不会显着影响MH3924A细胞的增殖（P = 0.135）。 用更高浓度的他克莫司（100-1,000μg/ L）处理后，MH3924A细胞的增殖显着增强（P <0.01）。 用任何浓度（10,50或100μg/ L）的AMD3100治疗对MH3924A细胞增殖无明显影响（P> 0.05）。 然而，当不同浓度的AMD3100与100μg/ L他克莫司合用时，MH3924A细胞的体外增殖增加（P <0.01）[3]。
体内
通过在第10天至第16天或第23天给予他克莫司至硫酸葡聚糖钠（DSS）处理的小鼠，研究了他克莫司对结肠炎的进展和持续的治疗效果。在第17和24天，结肠长度显着缩短，并且结肠重量 在DSS处理的对照动物中比在正常动物中显着更高。 此外，对照组每单位长度的结肠重量是正常组的两倍多。 虽然与对照组相比，用他克莫司治疗7和14天均显着抑制DSS治疗动物中每单位长度的结肠重量增加，但该治疗实际上并未恢复结肠缩短。 此外，他克莫司对单位长度结肠重量增加的抑制作用在14天而不是7天治疗时更为明显，如抑制百分比所示（59％对28％）
实验参考方法
细胞分析
通过MTT测定确定肿瘤细胞增殖。 简而言之，在MH3924A细胞达到对数生长期后，将96-mL细胞悬浮液以1×10 4细胞/ mL加入到96孔板的每个孔中，并在含有10％FBS，10μg/ L血管的DMEM中培养。 内皮生长因子和0.1 g / L肝素24 h。 当建立贴壁生长时，不同浓度的他克莫司（10,100和1,000μg/ L），AMD3100（10,50和100μg/ L）和他克莫司（0和100μg/ L）+ AMD3100（0,10,50） 将100μg/ L和100μg/ L加入板中。 仅在培养基中培养的未处理细胞用作对照。 培养48小时后，加入10μLMTT（5g / L），每孔孵育6小时; 然后，加入150μL/孔DMSO，然后在分光光度计读数器上测量570mm处的吸光度。 每个孔测量三次，每个样品一式三份进行测定。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
小鼠
将6周龄雄性C57BL / 6J小鼠维持在温度和湿度受控的房间中，具有12小时的明暗循环。 对于多剂量给药研究，将结肠小鼠（n = 10）以30mg / kg口服施用他克莫司7天（第10天至第16天）或14天（第10天至第23天）。 使用相同的方案给予对照（n = 10）和正常组（n = 5）安慰剂。 他克莫司或安慰剂以10mL / kg施用。 在最后一次给药后的第二天通过CO 2吸入使小鼠安乐死。 对于单次给药研究，在第7天，第10天，第17天或第24天，以30mg / kg口服施用他克莫司或在第7,10,17或24天口服施用安慰剂（n = 8）。使用相同的方案给予正常小鼠（n = 4）安慰剂。 。 在给药后8小时通过CO 2吸入使小鼠安乐死。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
生物活性
体外
他克莫司（FK506）抑制钙依赖性事件，例如IL-2基因转录，NO合酶活化，细胞脱粒和细胞凋亡。 他克莫司还通过与激素受体复合物中包含的FKBP结合来增强糖皮质激素和孕酮的作用，从而防止降解。 该试剂可以类似于CsA所证实的方式增强TGFβ-1基因的表达。 Tacrolimus抑制了响应T细胞受体结扎的T细胞增殖[1]。 用低浓度的他克莫司（FK506,10μg/ L）治疗不会显着影响MH3924A细胞的增殖（P = 0.135）。 用更高浓度的他克莫司（100-1,000μg/ L）处理后，MH3924A细胞的增殖显着增强（P <0.01）。 用任何浓度（10,50或100μg/ L）的AMD3100治疗对MH3924A细胞增殖无明显影响（P> 0.05）。 然而，当不同浓度的AMD3100与100μg/ L他克莫司合用时，MH3924A细胞的体外增殖增加（P <0.01）[3]。
体内
通过在第10天至第16天或第23天给予他克莫司至硫酸葡聚糖钠（DSS）处理的小鼠，研究了他克莫司对结肠炎的进展和持续的治疗效果。在第17和24天，结肠长度显着缩短，并且结肠重量 在DSS处理的对照动物中比在正常动物中显着更高。 此外，对照组每单位长度的结肠重量是正常组的两倍多。 虽然与对照组相比，用他克莫司治疗7和14天均显着抑制DSS治疗动物中每单位长度的结肠重量增加，但该治疗实际上并未恢复结肠缩短。 此外，他克莫司对单位长度结肠重量增加的抑制作用在14天而不是7天治疗时更为明显，如抑制百分比所示（59％对28％）
实验参考方法
细胞分析
通过MTT测定确定肿瘤细胞增殖。 简而言之，在MH3924A细胞达到对数生长期后，将96-mL细胞悬浮液以1×10 4细胞/ mL加入到96孔板的每个孔中，并在含有10％FBS，10μg/ L血管的DMEM中培养。 内皮生长因子和0.1 g / L肝素24 h。 当建立贴壁生长时，不同浓度的他克莫司（10,100和1,000μg/ L），AMD3100（10,50和100μg/ L）和他克莫司（0和100μg/ L）+ AMD3100（0,10,50） 将100μg/ L和100μg/ L加入板中。 仅在培养基中培养的未处理细胞用作对照。 培养48小时后，加入10μLMTT（5g / L），每孔孵育6小时; 然后，加入150μL/孔DMSO，然后在分光光度计读数器上测量570mm处的吸光度。 每个孔测量三次，每个样品一式三份进行测定。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
小鼠
将6周龄雄性C57BL / 6J小鼠维持在温度和湿度受控的房间中，具有12小时的明暗循环。 对于多剂量给药研究，将结肠小鼠（n = 10）以30mg / kg口服施用他克莫司7天（第10天至第16天）或14天（第10天至第23天）。 使用相同的方案给予对照（n = 10）和正常组（n = 5）安慰剂。 他克莫司或安慰剂以10mL / kg施用。 在最后一次给药后的第二天通过CO 2吸入使小鼠安乐死。 对于单次给药研究，在第7天，第10天，第17天或第24天，以30mg / kg口服施用他克莫司或在第7,10,17或24天口服施用安慰剂（n = 8）。使用相同的方案给予正常小鼠（n = 4）安慰剂。 。 在给药后8小时通过CO 2吸入使小鼠安乐死。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
