TG100-115是PI3K抑制剂

　　TG100-115 是一种选择性的 PI3Kγ/PI3Kδ 抑制剂，IC50 分别为 83 和 235 nM。

 

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　　TG100-115生物活性

 

　　在体外

 

　　TG100-115在IC50s分别为83和235nm时抑制PI3K样径和PI3K样径，而PI3K样径和PI3K样径相对不受影响（IC50值>1的值M）。作为一般特异性的测量，TG100-115还与133个蛋白激酶面板进行了检测，其中没有一个在IC50值<1个激酶M时被抑制。TG100-115对多种已知参与心肌梗死的介质（包括血管内皮生长因子和血小板激活因子）有效抑制水肿和炎症反应；相比之下，内皮细胞有丝分裂发生，这是一个重要的修复过程，组织生存后缺血损伤

 

　　体内

 

　　为了将这些体内反应与感兴趣的分子靶点联系起来，我们通过对Akt磷酸化（PI3K介导的事件）的western blot分析来监测PI3K通路信号。小鼠注射VEGF可诱导Akt的快速磷酸化，在肺裂解液中很容易检测到，TG100-115预处理可阻断这一反应。TG100-115的剂量低至0.5 mg/kg，并持续几个小时。在最初的剂量范围研究中，使用0.5-10 mg/kg的TG100-115剂量观察到一般相同的反应，因此我们选择在最低剂量进行统计学动力试验。再灌注30分钟后，TG100-115单次给药0.5 mg/kg静脉注射，与对照组相比，动物出现更小的梗死。测量梗死面积占左室缺血总面积的百分比，梗死面积减小35% （P=0.04）。缺血区活组织增加37% （P=0.04），直接证明了PI3K - 3 /抑制[1]的心脏保护作用。

 

　　实验参考方法

 

　　激酶试验

 

　　PI3K反应的构建使用重组人激酶，3的ATP，磷脂酰肌醇底物和辅助因子，和反应进程测量使用基于发光的检测系统，以量化ATP消耗。使用商业筛选服务[1]进行蛋白激酶测定。

 

　　MCE尚未独立证实这些方法的准确性。这些资料仅供参考。

 

　　细胞试验

 

　　将人脐静脉EC镀在96孔簇板（5000个细胞/孔）中，在有无测试化合物（如TG100-115）存在或不存在的条件下（10°M）（含0.5%血清和50ng /mL VEGF）中培养，24、48或72小时后用XTT法测定细胞数量。

 

　　MCE尚未独立证实这些方法的准确性。这些资料仅供参考。

 

　　动物实验方法

 

　　老鼠

 

　　给Sprague-Dawley大鼠（175-200 g）注射TG100-115 （1 mg/kg）或对照剂，1-4小时后给其注射Evans blue，剂量为500磅l的2%无菌生理盐水溶液。注射染料后，立即在动物剃毛后的每侧皮下注射100磅生理盐水、VEGF（2磅/毫升库存）或组胺（10磅/毫升库存）。30分钟后，拍摄注射部位。

 

　　MCE尚未独立证实这些方法的准确性。这些资料仅供参考。