SP600125
2019-03-14 
MCE小分子
SP600125是一种可逆，ATP竞争性的 JNK 抑制剂，抑制 JNK1， JNK2 和 JNK3 的 IC50 分别为 40, 40, 90 nM。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
SP600125的生物活性
体外
SP600125是一种ATP竞争性JNK2抑制剂，Ki值为0.19±0.06μM。 SP600125抑制c-Jun的磷酸化，在Jurkat T细胞中IC50为5μM至10μM。 在CD4 +细胞中，例如从人脐带或外周血中分离的Th0细胞，SP600125阻断细胞活化和分化，并抑制炎症基因COX-2，IL-2，IL-10，IFN-γ和TNF-α的表达。 IC50为5μM至12μM。 在小鼠β细胞中，MIN6，SP600125（20μM）诱导p38 MAPK的磷酸化及其下游CREB依赖性启动子激活。 在HCT116细胞中，SP600125（20μM）阻断G2期至有丝分裂转变并诱导核内复制。 SP600125的这种能力与JNK抑制无关，但由于其抑制Aurora A和Polo样激酶1上游的CDK1-细胞周期蛋白B激活。
体内
以15或30mg / kg i.v.施用SP600125。 显着抑制TNF-α血清水平，而口服给药剂量依赖性地阻断TNF-α表达，在口服30mg / kg时观察到显着抑制。 SP600125在体内减轻LPS诱导的大鼠ALI。 SP600125组大鼠BALF中TNF-α和IL-6的表达水平显着降低
实验参考方法
细胞分析
基本上进行mRNA半衰期的测定，除了在加入放线菌素D（5μg/ mL）之前用（细菌）脂多糖（LPS; 50ng / mL）刺激CD14 +细胞2小时。 在放线菌素D之后立即加入SP600125（25μM）或载体（0.5％DMSO vol / vol）。通??过使用实时逆转录（RT）-PCR进行分析。 用RNeasy Mini试剂盒提取总RNA。 使用TNF Taqman探针通过实时RT-PCR测量TNF mRNA。 通过使用甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）表达将所有数据标准化。 TNF-α正向引物是5'-CTGGCCCAGGCAGTCAGAT-3'，反向引物是5'-TATCTCTCAGCTCCACGCCATT-3'。 Taqman探针序列是5'-FAM-CCTGTAGCCCATGTTGTAGCAAACCCTCA-TAMRA-3'。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
小鼠
雌性CD-1小鼠（8-10周龄）静脉注射给药。 或者在PPCES载体中用SP600125（30％PEG-400/20％聚丙二醇/ 15％Cremophor EL / 5％乙醇/ 30％盐水），最终体积为5mL / kg，静脉注射15分钟。 用盐水（0.5mg / kg）注射LPS。 在90分钟时，从腹腔静脉获得末端出血，并回收血清。 通过使用ELISA分析样品的小鼠TNF-α。
大鼠
将40只雄性Wistar大鼠随机分为4组（n = 10）：对照组，LPS组，生理盐水组（NS）和SP600125组。 通过气管内注射LPS诱导急性肺损伤（ALI）。 简而言之，用戊巴比妥钠麻醉大鼠，然后气管内注射5mg / kg LPS。 然后将大鼠置于垂直位置并旋转1分钟以将LPS分布在肺中。 在LPS注射后10分钟通过腹膜内注射（15mg / kg）给予生理盐水或SP600125。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
SP600125的生物活性
体外
SP600125是一种ATP竞争性JNK2抑制剂，Ki值为0.19±0.06μM。 SP600125抑制c-Jun的磷酸化，在Jurkat T细胞中IC50为5μM至10μM。 在CD4 +细胞中，例如从人脐带或外周血中分离的Th0细胞，SP600125阻断细胞活化和分化，并抑制炎症基因COX-2，IL-2，IL-10，IFN-γ和TNF-α的表达。 IC50为5μM至12μM。 在小鼠β细胞中，MIN6，SP600125（20μM）诱导p38 MAPK的磷酸化及其下游CREB依赖性启动子激活。 在HCT116细胞中，SP600125（20μM）阻断G2期至有丝分裂转变并诱导核内复制。 SP600125的这种能力与JNK抑制无关，但由于其抑制Aurora A和Polo样激酶1上游的CDK1-细胞周期蛋白B激活。
体内
以15或30mg / kg i.v.施用SP600125。 显着抑制TNF-α血清水平，而口服给药剂量依赖性地阻断TNF-α表达，在口服30mg / kg时观察到显着抑制。 SP600125在体内减轻LPS诱导的大鼠ALI。 SP600125组大鼠BALF中TNF-α和IL-6的表达水平显着降低
实验参考方法
细胞分析
基本上进行mRNA半衰期的测定，除了在加入放线菌素D（5μg/ mL）之前用（细菌）脂多糖（LPS; 50ng / mL）刺激CD14 +细胞2小时。 在放线菌素D之后立即加入SP600125（25μM）或载体（0.5％DMSO vol / vol）。通??过使用实时逆转录（RT）-PCR进行分析。 用RNeasy Mini试剂盒提取总RNA。 使用TNF Taqman探针通过实时RT-PCR测量TNF mRNA。 通过使用甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）表达将所有数据标准化。 TNF-α正向引物是5'-CTGGCCCAGGCAGTCAGAT-3'，反向引物是5'-TATCTCTCAGCTCCACGCCATT-3'。 Taqman探针序列是5'-FAM-CCTGTAGCCCATGTTGTAGCAAACCCTCA-TAMRA-3'。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
小鼠
雌性CD-1小鼠（8-10周龄）静脉注射给药。 或者在PPCES载体中用SP600125（30％PEG-400/20％聚丙二醇/ 15％Cremophor EL / 5％乙醇/ 30％盐水），最终体积为5mL / kg，静脉注射15分钟。 用盐水（0.5mg / kg）注射LPS。 在90分钟时，从腹腔静脉获得末端出血，并回收血清。 通过使用ELISA分析样品的小鼠TNF-α。
大鼠
将40只雄性Wistar大鼠随机分为4组（n = 10）：对照组，LPS组，生理盐水组（NS）和SP600125组。 通过气管内注射LPS诱导急性肺损伤（ALI）。 简而言之，用戊巴比妥钠麻醉大鼠，然后气管内注射5mg / kg LPS。 然后将大鼠置于垂直位置并旋转1分钟以将LPS分布在肺中。 在LPS注射后10分钟通过腹膜内注射（15mg / kg）给予生理盐水或SP600125。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
