DHEA-Prasterone

    DHEA (Prasterone) 是最丰富的类固醇激素之一。 DHEA通过多种信号传导途径介导其作用，并通过转化成雄激素和雌激素衍生物（例如，雄激素，雌激素，7α和7β DHEA (Prasterone)，以及7α和7β表雄甾酮衍生物）通过其特异性受体起作用。

 

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    生物活性

 

    体外

 

    DHEA（孕酮）是一种有效的抗凋亡因子，可逆转血清剥夺诱导的前列腺癌细胞（DU145和LNCaP细胞系）以及结肠癌细胞（Caco2细胞系）的凋亡。DHEA（Prasterone）显着降低所有3种癌细胞的血清剥夺诱导的细胞凋亡，通过APOPercentage分析定量（用DHEA或NGF治疗12小时后，凋亡分别从0.587±0.053降低至0.142±0.0016或0.059±0.002） ； n = 3，P <0.01），并通过流式细胞仪分析（FACS）检测DU145细胞。DHEA的抗凋亡作用在纳摩尔浓度下与EC50呈剂量依赖性（在DU145和Caco2细胞中EC 50分别为 11.2±3.6 nM和12.4±2.2 nM）[1]。DHEA（孕酮）是人类主要的性类固醇前体，可直接转化为雄激素。DHEA（孕酮）（≥1μM）可引起Chub-S7增殖的剂量依赖性抑制，如胸苷掺入试验所评估。DHEA（Prasterone）处理以分化方式抑制分化前脂肪细胞中关键糖皮质激素调节基因H6PDH（≥100nM）和HSD11B1（≥1μM）的表达。为了与这一发现保持一致，DHEA（孕酮）治疗（≥1μM）导致使用最大DHEA剂量（25μMDHEA）时11β-HSD1氧化还原酶活性（≥1μM）显着降低，脱氢酶活性同时增加。在分化的脂肪细胞中。

 

    体内

 

    与饲喂对照AIN-76A饮食的小鼠相比，雄性B6小鼠（五只小鼠的组）的饮食（0.45％w / w）中的DHEA（孕酮）导致体温显着下降。类似的比较表明，对照和成对喂养的小鼠也有显着差异。饲喂DHEA（孕酮）的动物的温度比饲喂对照饮食的小鼠的温度低26/29倍。饲喂DHEA（Prasterone）饮食的小鼠对受影响较小，其8/29值显着低于随意饲喂AIN-76A的小鼠。饲喂DHEA（Prasterone）或饲喂DHEA（Prasterone）的小鼠的温度相差21/29倍。饲喂对照饮食的小鼠的体重明显大于饲喂DHEA或饲喂DHEA（成对孕酮）的小鼠的体重。除第9周（n = 3）外，每周平均从笼子中摄取的食物（克/天）（n = 7）。用DHEA（Prasterone）喂养的小鼠的食物摄入量显着减少。通过设计，喂入DHEA（孕酮）的小鼠对的饮食量大致相同。因此，似乎DHEA（孕酮）通过食物限制和单独的机制降低体温。

 

    实验参考方法

 

    细胞分析

 

    将Chub-S7前脂肪细胞和人原代前脂肪细胞分别以1×10 5和2.5×10 5的密度接种到24孔板中。过夜培养后，向培养基中补充DHEA，雄烯二醇或DHEA（孕酮）（0-100μM）。孵育24、48或72小时后，通过与放射性标记的胸苷（0.2μCi/孔）一起孵育最后6小时，评估细胞增殖。用TCA沉淀蛋白质，然后将细胞刮入NaOH中。通过闪烁计数分析所得裂解物中放射性标记核材料的各自含量。

 

    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

 

    Animal Administration

 

    小鼠

 

给小鼠喂Purina Lab Chow，直到实验开始（第0天）。然后在0900至1000小时之间，每组五只小鼠饲喂不含添加剂或DHEA（0.45％w / w）的AIN-76A颗粒饲料。饮食在4°C下保存不超过六个月以保持最佳活动。随意饮食给小鼠饮食，与配对接受DHEA（Prasterone）处理的小鼠配对的小鼠除外。成对喂食小鼠接受的AIN-76A饮食量由DHEA喂食小鼠每天消耗的食物重量决定。从第1天到第59天的不同时间点测量体重（克）。每天的食物摄入量（克/天）是通过称量五只小鼠每个笼子所消耗的食物来确定的。计算第1至8周的平均值±SEM值（n = 7）；第9周只有3天。

 

    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。