AZD1208是PIM抑制剂

    AZD1208 是一种新颖，可口服，具有高度选择性的 PIM 抑制剂。

 

    MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务

 

    生物活性

 

    体外

 

    AZD1208在巨核细胞白血病细胞系MOLM-16中显示出良好的抗增殖活性，GI 50值小于100 nM [1]。AZD1208（10μM）抑制Ramos细胞的生长，在1μM时，以1μM强烈抑制所有细胞中的PIM激酶。AZD1208诱导细胞凋亡，而PIM2敲低主要与细胞周期改变有关[2]。AZD1208和AZD2014的组合可通过AML细胞中的mTORC1 / 2信号迅速激活AMPKα，AMPKα是翻译机制的负调节剂。彻底抑制AKT和4EBP1激活；并抑制多核糖体的形成[3]。

 

    溶剂与溶解度

 

    体内

 

    请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案，配制前请先配制澄清的储备液，再依次添加助溶剂 (为保证实验结果的可靠性，体内实验的工作也建议您现用现配，当天使用；澄清的储备液可以根据储存条件，适当保存；以下溶剂前的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比)：

 

    1.请依序添加每种溶剂： 10% DMSO 》40％PEG300 》5％吐温80 》生理盐水45％

 

    溶解度：≥2.5 mg / mL（6.59 mM）; 清晰的解决方案

 

    2.请依序添加每种溶剂： 10% DMSO 》90％（盐水中20％SBE-β-CD）

 

    溶解度：≥2.5 mg / mL（6.59 mM）; 清晰的解决方案

 

    3.请依序添加每种溶剂： 10% DMSO 》90％玉米油

 

    溶解度：≥2.5 mg / mL（6.59 mM）; 清晰的解决方案

 

    *以上所有助溶剂都可在 MCE 网站选购。

 

    实验参考方法

 

    激酶测定

 

    使用Caliper LC3000阅读器上的迁移率漂移测定法测定纯化的人PIM-1，PIM-2和PIM-3酶在底物FL-Ahx-Bad（FITC-（AHX）RSRHSSYPAGT-COOH）上的活性。PIM-1分析在包含50 mM HEPES（pH 7.5），1 mM DTT，0.01％Tween 20、50 mg / mL BSA，10 mM MgCl 2的12 mL反应中进行，1.5 mM FL-Ahx-Bad肽，100 mM ATP，2.5 nM PIM-1和各种抑制剂。在25°C下温育90分钟后，将其与5 mL停止混合液淬灭，该停止混合液由100 mM HEPES，121 mM EDTA，0.8％涂层试剂3和0.01％Tween 20组成。用于PIM-2分析的ATP和酶浓度分别为5 mM和2.5 nM，而PIM-3分析使用的是50 mM的ATP和0.33 nM的酶。对于高[ATP]筛选，对于PIM-1和PIM-2都使用5 mM ATP和0.67 nM酶，或者对PIM-3使用0.11 nM PIM-3。检测磷酸化和未磷酸化的底物的荧光，并计算比例值以确定营业额百分比。使用IDBS ActivityBase软件根据剂量反应数据确定IC 50值。

 

    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

 

    细胞分析

 

    从DSMZ购买并在含有10％胎牛血清（FBS）和1％L-谷氨酰胺的RPMI中培养的MOLM-16细胞以20,000个细胞/孔接种在96孔板中过夜。细胞在37℃下处理与化合物或对照载体（二甲基亚砜）和细胞活力72小时加入细胞之后测量滴定度-蓝4小时和在Tecan读无限荧光? 200. GI 50是通过计算相对于赋形剂处理的细胞在每个剂量下的生长和在治疗时的细胞活力来确定。

 

    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。