Necrostatin-1抑制剂

    Necrostatin-1 (Nec-1) 是一种有效，选择性和可渗透细胞的坏死性凋亡 (necroptosis) 抑制剂，在 Jurkat 细胞中的 EC50 为 490 nM。Necrostatin-1 (Nec-1) 通过抑制坏死性凋亡途径中 RIP1 激酶 (EC50=182 nM) 起作用。Necrostatin-1 (Nec-1) 也是一种吲哚胺-2,3-二加氧酶 (IDO) 抑制剂。

 

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    生物活性

 

    体外

 

    Necrostatin-1（Nec-1）有效抑制TNFα诱导的L929细胞坏死性死亡，不需要外源半胱天冬酶抑制剂。

 

    Necrostatin-1（Nec-1）阻止了放射性造影剂（RCM）引起的肾小管周围毛细血管扩张，提示与RIP1激酶结构域细胞死亡无关的新作用在调节微血管血流动力学和造影剂诱发的AKI（CIAKI）的病理生理中。

 

    Necrostatin-1（Nec-1）（30 ?M）通过抑制坏死细胞死亡来增加心肌祖细胞（CMPC）的存活率

 

    体内

 

    Necrostatin-1（Nec-1）诱导肾小管扩张，并影响应用RCM后肾小管周围毛细血管扩张的动力学。在RCM前15分钟单次腹膜内应用单剂量的Necrostatin-1（1.65 mg / kg体重，腹膜内），可在观察期内避免回到基线水平

 

    实验参考方法

 

    细胞分析

 

    C6（3×10 5细胞/孔）和U87（1.5×10 5细胞/孔）胶质瘤细胞接种到96孔微孔板中并培养24小时。将PBS加入对照组，将Shikonin加入实验组以达到最终浓度。在指定时间点进行Shikonin处理后，使用MTT测定法评估细胞活力。使用自动多孔分光光度计读取570 nm处的吸光度值（A）。来自同一细胞系的两组神经胶质瘤细胞分别用较低或较高浓度的紫草素处理。其他两组神经胶质瘤细胞用100 ?M Necrostatin-1或40 ?M z-VAD-fmk处理1 h，然后与指定浓度的Shikonin共同孵育。另外，在相应的时间点，仅用100 ?M Necrostatin-1或40 ?M Z-VAD-fmk治疗另外两组神经胶质瘤细胞

 

    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

 

    Animal Administration

 

    老鼠

 

    8-10周龄雄性C57BL/6小鼠(平均体重约。23 g)被使用。老鼠接受静脉应用200μL PBS或radiocontrast媒体通过尾静脉(RCM)。单剂Z-VAD-fmk(体重10 mg/kg)或坏死抑制素-1(体重1.65 mg/kg)于rmm注射前15分钟腹腔注射。应用rcm后24小时(再灌注后48小时)再收获小鼠。从眶后出血中提取血样，测定血清尿素和肌酐水平。

 

    MCE尚未独立证实这些方法的准确性。它们仅供参考