Ponatinib抑制剂价格
2019-05-22 
MCE小分子
Ponatinib是一种有效的，可口服的多靶点激酶抑制剂，抑制Abl，PDGFRα，VEGFR2，FGFR1 和 Src 的 IC50 分别为0.37 nM， 1.1 nM，1.5 nM，2.2 nM和5.4 nM
Ponatinib的生物活性
体外研究
Ponatinib（AP24534）有效抑制天然ABL（IC50：0.37nM），ABLT315I（IC50：2.0nM）和其他临床上重要的ABL激酶结构域突变体（IC50：0.30-0.44nM）。Ponatinib还抑制SRC（IC50：5.4nM）和受体酪氨酸激酶的VEGFR，FGFR和PDGFR家族成员。Ponatinib有效抑制表达天然BCR-ABL的Ba / F3细胞的增殖（IC50：0.5nM）。 所有测试的BCR-ABL突变体对Ponatinib（IC50：0.5-36 nM）仍然敏感，包括BCR-ABLT315I（IC50：11 nM）。 Ponatinib（AP24534）抑制FLT3，KIT，FGFR1和PDGFRα的体外激酶活性，IC50值分别为13,13,2和1nM。 Ponatinib以剂量依赖性方式抑制所有4种RTK的磷酸化，IC5??0值在0.3至20nM之间。 与这些激活受体在驱动白血病发生中重要的一致，Ponatinib也有效抑制所有4种细胞系的活力，IC50值为0.5至17nM。 相反，抑制RS4的IC50;表达天然（未突变的）FLT3的11个细胞超过100nM。
体内研究
在其中小鼠注射Ba / F3 BCR-ABLT315I细胞的存活模型中，以高达300mg / kg的剂量施用达沙替尼对存活时间没有影响。 相比之下，使用Ponatinib（AP24534）治疗可以剂量依赖的方式延长生存期。 Ponatinib以5,15和25mg / kg口服给药19天，将中位存活时间延长至19.5,26和30天，分别与载体治疗小鼠的16天相比（所有三个剂量水平p <0.01）。 在异种移植模型中进一步评估Ponatinib（AP24534）的抗肿瘤活性，其中将Ba / F3 BCR-ABLT315I细胞皮下注射到小鼠中。 与载体治疗的小鼠相比，Ponatinib以剂量依赖性方式抑制肿瘤生长，每日口服10和30mg / kg时肿瘤生长受到显着抑制（％T / C分别为68％和20％; 两种剂量水平均p <0.01）。 每日口服50mg / kg Ponatinib引起显着的肿瘤消退（％T / C = 0.9％，p <0.01），与治疗开始时相比，最终测量的平均肿瘤体积减少96％。 在研究期间，Ponatinib在所有有效剂量水平下都具有良好的耐受性; 对于10,30和50mg / kg剂量组，体重的最大降低分别<5％，<5％和<12％，没有明显毒性的迹象。 将Ponatinib（1-25mg / kg）口服给药，每天一次，持续28天，给予携带MV4-11异种移植物的小鼠。 Ponatinib以剂量依赖性方式有效抑制肿瘤生长。 给予1 mg / kg（最低剂量）可显着抑制肿瘤生长（TGI = 46％，P <0.01），2.5 mg / kg或更高剂量可导致肿瘤消退
Ponatinib的实验参考方法
细胞分析
将Ba / F3细胞系分布在96孔板（4×103细胞/孔）中，并与升高浓度的Ponatinib孵育72小时。使用的抑制剂范围是：对于表达BCR-ABL的细胞为0-625nM，对于BCR-ABL阴性细胞为0-10,000nM。 使用基于甲硫基磺酸盐（MTS）的活力测定法测量增殖。IC50值报告为一式四份进行的三次独立实验的平均值。对于使用CML或正常原代细胞的细胞增殖实验，将单核细胞接种于96孔板（5×104细胞/孔）中，梯度浓度的Ponatinib（0-1000nM）在补充有10％FBS，L-谷氨酰胺的RPMI中 ，青霉素/链霉素和100μMβ-巯基乙醇。孵育72小时后，通过对细胞进行MTS测定来评估细胞活力。
Animal Administration
小鼠
对于Ba / F3存活模型，将表达天然BCR-ABL或BCR-ABLT315I的Ba / F3细胞注射到雌性SCID小鼠的尾静脉中（100μL在无血清培养基中的1×10 7个细胞/ mL悬浮液）。开始72小时后，通过用载体（25mM柠檬酸盐缓冲液，pH 2.75），Ponatinib或达沙替尼口服管饲法每天一次处理小鼠，连续19天。 根据IACUC指南牺牲濒死动物。在尸检时，由于肿瘤细胞浸润，小鼠有明显的脾肿大。使用Kaplan-Meier方法分析存活数据，并且使用Log-rank测试评估统计显着性，比较每个治疗组与媒介物组的存活时间。对于Ba / F3肿瘤模型，将Ba / F3 BCR-ABLT315I细胞皮下植入雌性裸鼠的右胁腹（100μL在无血清培养基中的1×10 7细胞/ mL细胞悬浮液）。 当平均肿瘤体积达到约500mm 3时，将小鼠随机分配至治疗组。用载体（25mM柠檬酸盐缓冲液，pH 2.75）或Ponatinib口服管饲法每天一次处理小鼠，连续19天。 计算肿瘤体积（mm 3）。为了在治疗期结束时确定肿瘤生长抑制，在最终测量时计算治疗组的平均肿瘤体积/对照组的平均肿瘤体积（％T / C）
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Ponatinib的生物活性
体外研究
Ponatinib（AP24534）有效抑制天然ABL（IC50：0.37nM），ABLT315I（IC50：2.0nM）和其他临床上重要的ABL激酶结构域突变体（IC50：0.30-0.44nM）。Ponatinib还抑制SRC（IC50：5.4nM）和受体酪氨酸激酶的VEGFR，FGFR和PDGFR家族成员。Ponatinib有效抑制表达天然BCR-ABL的Ba / F3细胞的增殖（IC50：0.5nM）。 所有测试的BCR-ABL突变体对Ponatinib（IC50：0.5-36 nM）仍然敏感，包括BCR-ABLT315I（IC50：11 nM）。 Ponatinib（AP24534）抑制FLT3，KIT，FGFR1和PDGFRα的体外激酶活性，IC50值分别为13,13,2和1nM。 Ponatinib以剂量依赖性方式抑制所有4种RTK的磷酸化，IC5??0值在0.3至20nM之间。 与这些激活受体在驱动白血病发生中重要的一致，Ponatinib也有效抑制所有4种细胞系的活力，IC50值为0.5至17nM。 相反，抑制RS4的IC50;表达天然（未突变的）FLT3的11个细胞超过100nM。
体内研究
在其中小鼠注射Ba / F3 BCR-ABLT315I细胞的存活模型中，以高达300mg / kg的剂量施用达沙替尼对存活时间没有影响。 相比之下，使用Ponatinib（AP24534）治疗可以剂量依赖的方式延长生存期。 Ponatinib以5,15和25mg / kg口服给药19天，将中位存活时间延长至19.5,26和30天，分别与载体治疗小鼠的16天相比（所有三个剂量水平p <0.01）。 在异种移植模型中进一步评估Ponatinib（AP24534）的抗肿瘤活性，其中将Ba / F3 BCR-ABLT315I细胞皮下注射到小鼠中。 与载体治疗的小鼠相比，Ponatinib以剂量依赖性方式抑制肿瘤生长，每日口服10和30mg / kg时肿瘤生长受到显着抑制（％T / C分别为68％和20％; 两种剂量水平均p <0.01）。 每日口服50mg / kg Ponatinib引起显着的肿瘤消退（％T / C = 0.9％，p <0.01），与治疗开始时相比，最终测量的平均肿瘤体积减少96％。 在研究期间，Ponatinib在所有有效剂量水平下都具有良好的耐受性; 对于10,30和50mg / kg剂量组，体重的最大降低分别<5％，<5％和<12％，没有明显毒性的迹象。 将Ponatinib（1-25mg / kg）口服给药，每天一次，持续28天，给予携带MV4-11异种移植物的小鼠。 Ponatinib以剂量依赖性方式有效抑制肿瘤生长。 给予1 mg / kg（最低剂量）可显着抑制肿瘤生长（TGI = 46％，P <0.01），2.5 mg / kg或更高剂量可导致肿瘤消退
Ponatinib的实验参考方法
细胞分析
将Ba / F3细胞系分布在96孔板（4×103细胞/孔）中，并与升高浓度的Ponatinib孵育72小时。使用的抑制剂范围是：对于表达BCR-ABL的细胞为0-625nM，对于BCR-ABL阴性细胞为0-10,000nM。 使用基于甲硫基磺酸盐（MTS）的活力测定法测量增殖。IC50值报告为一式四份进行的三次独立实验的平均值。对于使用CML或正常原代细胞的细胞增殖实验，将单核细胞接种于96孔板（5×104细胞/孔）中，梯度浓度的Ponatinib（0-1000nM）在补充有10％FBS，L-谷氨酰胺的RPMI中 ，青霉素/链霉素和100μMβ-巯基乙醇。孵育72小时后，通过对细胞进行MTS测定来评估细胞活力。
Animal Administration
小鼠
对于Ba / F3存活模型，将表达天然BCR-ABL或BCR-ABLT315I的Ba / F3细胞注射到雌性SCID小鼠的尾静脉中（100μL在无血清培养基中的1×10 7个细胞/ mL悬浮液）。开始72小时后，通过用载体（25mM柠檬酸盐缓冲液，pH 2.75），Ponatinib或达沙替尼口服管饲法每天一次处理小鼠，连续19天。 根据IACUC指南牺牲濒死动物。在尸检时，由于肿瘤细胞浸润，小鼠有明显的脾肿大。使用Kaplan-Meier方法分析存活数据，并且使用Log-rank测试评估统计显着性，比较每个治疗组与媒介物组的存活时间。对于Ba / F3肿瘤模型，将Ba / F3 BCR-ABLT315I细胞皮下植入雌性裸鼠的右胁腹（100μL在无血清培养基中的1×10 7细胞/ mL细胞悬浮液）。 当平均肿瘤体积达到约500mm 3时，将小鼠随机分配至治疗组。用载体（25mM柠檬酸盐缓冲液，pH 2.75）或Ponatinib口服管饲法每天一次处理小鼠，连续19天。 计算肿瘤体积（mm 3）。为了在治疗期结束时确定肿瘤生长抑制，在最终测量时计算治疗组的平均肿瘤体积/对照组的平均肿瘤体积（％T / C）
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
