LY2157299是选择性的 TGF-β 受体抑制剂
2019-04-19 
MCE小分子
Galunisertib (LY2157299) 是一种选择性的 TGF-β 受体抑制剂，IC50 为 56 nM
LY2157299生物活性
体外
Galunisertib（LY2157299）是TGF-β受体（TβR）的选择性ATP模拟抑制剂-I活化LY2157299（0.1,1,10和100μM）显示索拉非尼在SK-Sora，HepG2中的轻微剂量依赖性增强， 和Hep3B细胞系，但在JHH6，SK-HEP1和HuH7细胞系中没有。
体内
将人异种移植物Calu6（非小细胞肺癌）和MX1（乳腺癌）皮下植入裸鼠中。 在口服施用75mg / kg后，Galunisertib（LY2157299）诱导两种类型细胞系的pSmad降低70％。 pSmad恢复80％基线的时间在给药后约6小时
实验参考方法
细胞分析
使用MTT测定确定细胞存活。 黄色水溶性四唑MTT转化为紫色不溶性甲烷由线粒体脱氢酶催化并用于估计活细胞的数量。 简言之，将细胞以2×103细胞/孔的密度接种在96孔组织培养板中。 药物暴露后，将细胞与0.4mg / mL MTT在37℃下孵育4小时。 温育后，弃去上清液，将不溶性甲crystals沉淀物溶于0.1mL DMSO中，用酶标仪在560nm处测量吸光度。 具有未处理细胞的孔或含有不含细胞的含药物培养基分别用作阳性和阴性对照。 对于增殖测定，每天进行MTT测定以确定未处理对照和加仑替尼（LY2157299）（0.1,1,10和10μM）处理组中的活细胞数。
动物研究实验
小鼠
使用Charles River裸鼠（体重25mg）。 Galunisertib（LY2157299）以单剂量或多剂量设计口服给药。 以单剂量方式给予的剂量水平的值是10（n = 3），30（n = 8），50（n = 26），75（n = 69），100（n = 3），150（ n = 21）和300（n = 3）mg / kg。 在以下时间处死动物：给药后0.5,1,1.5,2,4,8和16小时，然后除去肿瘤并回收血液。 在多次给药研究中，Galunisertib（LY2157299）每天两次（bid）以75mg / kg的剂量每12小时施用，连续20天给予31只小鼠。 在第10,15,20和25天最后一次给药后2小时处死动物，取出肿瘤用于pSmad测定，并回收血液以测定血浆中的药物水平。
LY2157299生物活性
体外
Galunisertib（LY2157299）是TGF-β受体（TβR）的选择性ATP模拟抑制剂-I活化LY2157299（0.1,1,10和100μM）显示索拉非尼在SK-Sora，HepG2中的轻微剂量依赖性增强， 和Hep3B细胞系，但在JHH6，SK-HEP1和HuH7细胞系中没有。
体内
将人异种移植物Calu6（非小细胞肺癌）和MX1（乳腺癌）皮下植入裸鼠中。 在口服施用75mg / kg后，Galunisertib（LY2157299）诱导两种类型细胞系的pSmad降低70％。 pSmad恢复80％基线的时间在给药后约6小时
实验参考方法
细胞分析
使用MTT测定确定细胞存活。 黄色水溶性四唑MTT转化为紫色不溶性甲烷由线粒体脱氢酶催化并用于估计活细胞的数量。 简言之，将细胞以2×103细胞/孔的密度接种在96孔组织培养板中。 药物暴露后，将细胞与0.4mg / mL MTT在37℃下孵育4小时。 温育后，弃去上清液，将不溶性甲crystals沉淀物溶于0.1mL DMSO中，用酶标仪在560nm处测量吸光度。 具有未处理细胞的孔或含有不含细胞的含药物培养基分别用作阳性和阴性对照。 对于增殖测定，每天进行MTT测定以确定未处理对照和加仑替尼（LY2157299）（0.1,1,10和10μM）处理组中的活细胞数。
动物研究实验
小鼠
使用Charles River裸鼠（体重25mg）。 Galunisertib（LY2157299）以单剂量或多剂量设计口服给药。 以单剂量方式给予的剂量水平的值是10（n = 3），30（n = 8），50（n = 26），75（n = 69），100（n = 3），150（ n = 21）和300（n = 3）mg / kg。 在以下时间处死动物：给药后0.5,1,1.5,2,4,8和16小时，然后除去肿瘤并回收血液。 在多次给药研究中，Galunisertib（LY2157299）每天两次（bid）以75mg / kg的剂量每12小时施用，连续20天给予31只小鼠。 在第10,15,20和25天最后一次给药后2小时处死动物，取出肿瘤用于pSmad测定，并回收血液以测定血浆中的药物水平。
