Valproic acid
2019-03-27 
MCE小分子
Valproic acid 是一种 HDAC 抑制剂，IC50 值为 0.5-2 mM，抑制 HDAC1 的活性，(IC50，400 μM)，同时可诱导 HDAC2 的降解；Valproic acid sodium salt 可用于癫痫、双相情感障碍和偏头痛等的研究。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
Valproic acid生物活性
体外
丙戊酸分别在24和72小时抑制生长剂量和时间依赖性，IC50分别为10和4mM。 丙戊酸显着减弱总HDAC，细胞溶质和核HDAC的活性。 丙戊酸增加HeLa细胞中乙酰化组蛋白3的形式。 丙戊酸（1-3mM）诱导G1期阻滞，而10mM丙戊酸显着诱导HeLa细胞中细胞周期的G2 / M期阻滞。 此外，丙戊酸在24小时时以剂量依赖性方式增加HeLa细胞中亚G1细胞的百分比。 丙戊酸抑制VEGF，VEGFR2和bFGF的mRNA和蛋白质表达。 丙戊酸抑制HDAC1的蛋白表达，增加组蛋白H3乙酰化，并增强高乙酰化组蛋白H3在VEGF启动子上的积累。 丙戊酸处理导致原代小鼠肝细胞中磷酸化AMPK / ACC水平增加。 丙戊酸处理后ACC的磷酸化是AMPK依赖性的。 丙戊酸抑制小鼠肝核提取物和人重组HDAC1的脱乙酰酶活性，而丙戊酸的代谢产物，只有2-烯 - 丙戊酸和4-烯 - 丙戊酸降低脱乙酰酶活性。
体内
丙戊酸（500mg / kg，i.p。）抑制移植Kasumi-1细胞的小鼠的肿瘤生长和血管生成。 在实验结束时，丙戊酸组的IR率为57.25％。 丙戊酸（350 mg / kg，i.p。）表现出比对照动物更多的社会调查和打斗
Valproic acid实验参考方法
激酶测定
使用半胱天冬酶-3，-8和-9比色测定试剂盒分别评估胱天蛋白酶-3，-8和-9的活性。 简而言之，将60-mm培养皿中的1×10 6个细胞与10mM丙戊酸一起温育24小时。 然后将细胞在PBS中洗涤并悬浮在试剂盒提供的5倍体积的裂解缓冲液中。 使用Bradford方法测定蛋白质浓度。 含有50μg总蛋白的上清液用于测定胱天蛋白酶-3，-8和-9活性。 将上清液加入96孔微量滴定板中的每个孔中，其中DEVD-pNA，IETD-pNA或LEHD-pNA作为半胱天冬酶-3，-8和-9底物，并将板在37℃温育1小时。 使用酶标仪在405nm处测量每个孔的光密度。 胱天蛋白酶-3，-8和-9的活性以任意吸光度单位表示。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
细胞分析
简而言之，将5×10 5个细胞接种在96孔微量滴定板中用于MTT测定。 在指定剂量的丙戊酸暴露指定时间后，将MTT溶液[20mL：2mg / mL在磷酸盐缓冲盐水（PBS）中]加入96孔板的每个孔中。 将板另外在37℃下孵育3小时。 通过移液将培养基从培养板中取出，并向每个孔中加入200mL DMSO以溶解甲crystals晶体。 使用酶标仪在570nm下测量光密度。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
在BALB / c裸鼠上进行脾切除术。 脾切除后一周，小鼠接受全身照射，剂量为4Gy的137Cs。 在照射后48-72小时，在右腋窝区域向小鼠皮下植入Kasumi-1细胞（2×10 7个细胞/小鼠，0.15-0.2mL）。 小鼠随机分为两组，丙戊酸（n = 6）和对照组（n = 6）。 当肿瘤在植入后10天大小为200mm 3时，每天腹膜内注射0.2mL丙戊酸（500mg / kg体重）或0.2mL盐水。 将丙戊酸以25mg / mL的浓度溶解在盐水中。 每三天测量肿瘤的最长直径（a）和最短直径（b），并根据下式计算肿瘤体积（TV）：TV = 1/2×a×b2。 注射两周后，通过颈脱位处死小鼠并取出肿瘤块用于以下实验。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
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Valproic acid生物活性
体外
丙戊酸分别在24和72小时抑制生长剂量和时间依赖性，IC50分别为10和4mM。 丙戊酸显着减弱总HDAC，细胞溶质和核HDAC的活性。 丙戊酸增加HeLa细胞中乙酰化组蛋白3的形式。 丙戊酸（1-3mM）诱导G1期阻滞，而10mM丙戊酸显着诱导HeLa细胞中细胞周期的G2 / M期阻滞。 此外，丙戊酸在24小时时以剂量依赖性方式增加HeLa细胞中亚G1细胞的百分比。 丙戊酸抑制VEGF，VEGFR2和bFGF的mRNA和蛋白质表达。 丙戊酸抑制HDAC1的蛋白表达，增加组蛋白H3乙酰化，并增强高乙酰化组蛋白H3在VEGF启动子上的积累。 丙戊酸处理导致原代小鼠肝细胞中磷酸化AMPK / ACC水平增加。 丙戊酸处理后ACC的磷酸化是AMPK依赖性的。 丙戊酸抑制小鼠肝核提取物和人重组HDAC1的脱乙酰酶活性，而丙戊酸的代谢产物，只有2-烯 - 丙戊酸和4-烯 - 丙戊酸降低脱乙酰酶活性。
体内
丙戊酸（500mg / kg，i.p。）抑制移植Kasumi-1细胞的小鼠的肿瘤生长和血管生成。 在实验结束时，丙戊酸组的IR率为57.25％。 丙戊酸（350 mg / kg，i.p。）表现出比对照动物更多的社会调查和打斗
Valproic acid实验参考方法
激酶测定
使用半胱天冬酶-3，-8和-9比色测定试剂盒分别评估胱天蛋白酶-3，-8和-9的活性。 简而言之，将60-mm培养皿中的1×10 6个细胞与10mM丙戊酸一起温育24小时。 然后将细胞在PBS中洗涤并悬浮在试剂盒提供的5倍体积的裂解缓冲液中。 使用Bradford方法测定蛋白质浓度。 含有50μg总蛋白的上清液用于测定胱天蛋白酶-3，-8和-9活性。 将上清液加入96孔微量滴定板中的每个孔中，其中DEVD-pNA，IETD-pNA或LEHD-pNA作为半胱天冬酶-3，-8和-9底物，并将板在37℃温育1小时。 使用酶标仪在405nm处测量每个孔的光密度。 胱天蛋白酶-3，-8和-9的活性以任意吸光度单位表示。
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细胞分析
简而言之，将5×10 5个细胞接种在96孔微量滴定板中用于MTT测定。 在指定剂量的丙戊酸暴露指定时间后，将MTT溶液[20mL：2mg / mL在磷酸盐缓冲盐水（PBS）中]加入96孔板的每个孔中。 将板另外在37℃下孵育3小时。 通过移液将培养基从培养板中取出，并向每个孔中加入200mL DMSO以溶解甲crystals晶体。 使用酶标仪在570nm下测量光密度。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
在BALB / c裸鼠上进行脾切除术。 脾切除后一周，小鼠接受全身照射，剂量为4Gy的137Cs。 在照射后48-72小时，在右腋窝区域向小鼠皮下植入Kasumi-1细胞（2×10 7个细胞/小鼠，0.15-0.2mL）。 小鼠随机分为两组，丙戊酸（n = 6）和对照组（n = 6）。 当肿瘤在植入后10天大小为200mm 3时，每天腹膜内注射0.2mL丙戊酸（500mg / kg体重）或0.2mL盐水。 将丙戊酸以25mg / mL的浓度溶解在盐水中。 每三天测量肿瘤的最长直径（a）和最短直径（b），并根据下式计算肿瘤体积（TV）：TV = 1/2×a×b2。 注射两周后，通过颈脱位处死小鼠并取出肿瘤块用于以下实验。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
