XAV-939
2019-03-19 
MCE小分子
XAV-939是端锚聚合酶 (tankyrase (TNKS)) 抑制剂，也是间接的 Wnt/β-catenin signaling 抑制剂。抑制 TNKS1 和 TNKS2 的 IC50 分别为 5 和 2 nM。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
XAV-939生物活性
体外
XAV939（1μM）强烈抑制SW480细胞中的STF活性，Wnt3a刺激HEK293细胞中的STF活性，但不影响CRE，NF-κB或TGF-β荧光素酶报告基因。XAV939通过HEK293细胞中的端锚聚合酶抑制来调节轴蛋白水平。XAV939（0.5μM，1.0μM）降低人类淋巴母细胞中相对DMSO对照的50％DNA-PKcs蛋白水平。 XAV939诱导第二波心肌细胞基因表达，如Wnt抑制后2至4天Mesp1和Isl1表达增加，以及XAV939加入后4至6天Nkx2.5表达增加所示。XAV-939（10 nM）对IL-1β诱导的SW 1353细胞中MMP-13水平升高具有抑制作用。
体内
XAV-939（3 mL，10 nM）对大鼠OA模型中升高的MMP-13水平具有抑制作用。 XAV-939（1mg / mL，i.p。）改善由IMQ诱导的牛皮癣样皮肤病。XAV-939导致IMQ诱导的表皮增生（由棘皮症表现）和小鼠皮肤炎症浸润显着减少
实验参考方法
XAV-939激酶测定
为了评估化合物对TNKS自身PARsylation的影响，将含有SAM结构域和TNKS2的PARP结构域的aμMGST融合蛋白（aa 872-1166）与5μM生物素-NAD +和2μMXAV939或LDW643在30℃混合。°C 2.5小时。 通过SDS-PAGE分离样品并用链霉抗生物素蛋白AlexaFluor680探测。 为了评估axin的PARsylation，将重组全长TNKS2（在细菌中表达/纯化为N-末端His-标记的蛋白质）与生物素-NAD +存在下与GST-axin 1（1-280）一起孵育，有或没有XAV939。使用链霉抗生物素蛋白-HRP解析和探测产物，并使用AlphaInnotech成像仪成像。为了评估XAV939，IWR-1-enod，IWR-1-exo和ABT-888对TNKS2自身PARsylation的影响，将His标记的全长TNKS2与5μM生物素-NAD +和3mM指示物一起孵育。 化合物。 用链霉抗生物素蛋白-HRP解析和探测产物。 基于LC / MS的PARP1，PARP2，TNKS1和TNKS2的高通量自动PARsylation测定被设置为在小分子抑制剂存在下监测烟酰胺（PARsylation反应的副产物）的形成。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
细胞分析
将人SW1353软骨肉瘤细胞接种在96孔板（1×10 4细胞/孔）中并用淫羊藿苷（0,5,10,20,40,80或100μM）处理。 24小时后，向每个孔中加入20μLMTT（在PBS中5mg / mL），并将板在37℃下再孵育4小时。 然后除去上清液，向每个孔中加入150μL二甲基亚砜。 将板摇动10分钟后，使用ELISA读数器记录在570nm处测量的光密度值。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
将C57BL / 6J小鼠保持在无特定病原体的条件下。 XAV-939以1mg / mL的剂量腹膜内注射，每天一次，连续7天IMQ治疗（注射体积100μL）。 对照小鼠注射100μL10％DMSO / 90％0.9％NaCl，XAV-939的溶剂。 为了改善在这些实验研究中观察到的任何小鼠的痛苦，通过吸入CO 2使它们安乐死。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
XAV-939生物活性
体外
XAV939（1μM）强烈抑制SW480细胞中的STF活性，Wnt3a刺激HEK293细胞中的STF活性，但不影响CRE，NF-κB或TGF-β荧光素酶报告基因。XAV939通过HEK293细胞中的端锚聚合酶抑制来调节轴蛋白水平。XAV939（0.5μM，1.0μM）降低人类淋巴母细胞中相对DMSO对照的50％DNA-PKcs蛋白水平。 XAV939诱导第二波心肌细胞基因表达，如Wnt抑制后2至4天Mesp1和Isl1表达增加，以及XAV939加入后4至6天Nkx2.5表达增加所示。XAV-939（10 nM）对IL-1β诱导的SW 1353细胞中MMP-13水平升高具有抑制作用。
体内
XAV-939（3 mL，10 nM）对大鼠OA模型中升高的MMP-13水平具有抑制作用。 XAV-939（1mg / mL，i.p。）改善由IMQ诱导的牛皮癣样皮肤病。XAV-939导致IMQ诱导的表皮增生（由棘皮症表现）和小鼠皮肤炎症浸润显着减少
实验参考方法
XAV-939激酶测定
为了评估化合物对TNKS自身PARsylation的影响，将含有SAM结构域和TNKS2的PARP结构域的aμMGST融合蛋白（aa 872-1166）与5μM生物素-NAD +和2μMXAV939或LDW643在30℃混合。°C 2.5小时。 通过SDS-PAGE分离样品并用链霉抗生物素蛋白AlexaFluor680探测。 为了评估axin的PARsylation，将重组全长TNKS2（在细菌中表达/纯化为N-末端His-标记的蛋白质）与生物素-NAD +存在下与GST-axin 1（1-280）一起孵育，有或没有XAV939。使用链霉抗生物素蛋白-HRP解析和探测产物，并使用AlphaInnotech成像仪成像。为了评估XAV939，IWR-1-enod，IWR-1-exo和ABT-888对TNKS2自身PARsylation的影响，将His标记的全长TNKS2与5μM生物素-NAD +和3mM指示物一起孵育。 化合物。 用链霉抗生物素蛋白-HRP解析和探测产物。 基于LC / MS的PARP1，PARP2，TNKS1和TNKS2的高通量自动PARsylation测定被设置为在小分子抑制剂存在下监测烟酰胺（PARsylation反应的副产物）的形成。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
细胞分析
将人SW1353软骨肉瘤细胞接种在96孔板（1×10 4细胞/孔）中并用淫羊藿苷（0,5,10,20,40,80或100μM）处理。 24小时后，向每个孔中加入20μLMTT（在PBS中5mg / mL），并将板在37℃下再孵育4小时。 然后除去上清液，向每个孔中加入150μL二甲基亚砜。 将板摇动10分钟后，使用ELISA读数器记录在570nm处测量的光密度值。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
将C57BL / 6J小鼠保持在无特定病原体的条件下。 XAV-939以1mg / mL的剂量腹膜内注射，每天一次，连续7天IMQ治疗（注射体积100μL）。 对照小鼠注射100μL10％DMSO / 90％0.9％NaCl，XAV-939的溶剂。 为了改善在这些实验研究中观察到的任何小鼠的痛苦，通过吸入CO 2使它们安乐死。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考
