Bleomycin sulfate-硫酸博来霉素

    Bleomycin sulfate是具有有效抗肿瘤活性的DNA合成抑制剂。

 

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    生物活性

 

    体外

 

    博来霉素（BLM）被选为研究对象中具有不同遗传毒性机制的人类淋巴细胞中最受研究的微核（MN）诱导剂。博来霉素诱导的最常见的DNA损伤是单链断裂和双链断裂，以及单一的apuinic / apyrimidinic网站。同时，博来霉素是真正的放射模拟化合物，几乎完全类似于电离辐射的遗传效应[1]。硫酸博来霉素对UT-SCC-19A细胞株的IC 50值为4.0±1.3 nM。UT-SCC-12A和UT-SCC-12B都对博来霉素（BLM）更具抵抗力。IC 50值分别为14.2±2.8 nM和13.0±1.1 nM [2]。与治疗后18小时的对照培养相比，博来霉素（BLM）诱导异常细胞（即显示至少一种畸变的细胞）的百分比和每个细胞的染色体畸变的频率显着增加（p <0.05）。

 

    体内

 

    与博来霉素（In-111-BLMC）结合使用的短程发射β放射性核素是SCC中的肿瘤靶向剂。在35天内，裸鼠的体重增加了2.8±0.6g。肿瘤接种后第25和35天，肿瘤体积分别为111±51mm 3和874±577mm 3。计算的倍增时间为3.86±0.76天。SCC细胞系显示出对博来霉素的不同敏感性。我们的SCC肿瘤异种移植模型显示出快速增长的特性，适合使用In-111-BLMC进行放射化学治疗研究。In-111-BLMC在体内的摄取与增殖活性成正比，可以通过动物模型剂量计算来预测具有高结合能力的肿瘤[2]。。博来霉素（BLM）治疗后第7天和第14天，TGF-β1的信号明显强于对照组。治疗后28天，TGF-β1信号变弱。博来霉素加Dex组在第7和14天，TGF-β1的信号也比对照组强。但是，在第28天，TGF-β1信号变得较弱，并且比对照组的水平略强。通过比较平均IOD值[4]给出所有结果。

 

    实验参考方法

 

    细胞分析

 

    ADIPO-P2细胞在37°C和5％CO 2气氛下，在添加20％胎牛血清，青霉素（100 U / mL）和链霉素（100μg/ mL）的D-MEM高葡萄糖培养基中生长。在含有1.5×10 5的 TC25康宁烧瓶中以单层培养细胞细胞/ mL。对于每个实验，设置两个烧瓶，一个用于对照，一个用于处理的培养物。在生长的对数期，用2.5μg/ mL博来霉素（溶于无菌0.9％NaCl）的30分钟脉冲处理ADIPO-P2细胞。平行建立对照培养物，但不暴露于博来霉素。在用博来霉素脉冲处理结束时，将细胞用汉克（Hank）平衡盐溶液洗涤两次，并在新鲜培养基中培养直至收获。在处理后的5次传代或继代培养中，细胞连续保持在培养中。每当培养物汇合时就进行继代培养（大约4×10 5细胞/毫升培养基）。为了估计细胞的生长，在进行亚培养时，通过胰蛋白酶消化收集细胞，将等分试样约200μL用0.4％的锥虫蓝染色，然后确定存活细胞的数量（未染色的细胞）。

 

    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

 

    Animal Administration

 

    小鼠

 

    60只CD-1小鼠随机分为以下3组（每组n = 20）：生理盐水；盐水；盐水；盐水；盐水；盐水；盐水。博来霉素-水；博来霉素加地塞米松（Dex）。盐水组的小鼠气管内注射2 mL / kg盐水。其他的则通过气管内注射博来霉素（5 mg / kg，2 mL / kg的生理盐水）。博来霉素处理后二十四小时，通过管饲法给小鼠0.45 mg / kg / d DEX。将博来霉素或盐水进行气管内注射的日期指定为第0天。

 

    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。