G-418 disulfate抑制剂
G-418 disulfate 是与 gentamicin B1 的结构相似的氨基糖苷类抗生素,在原核和真核细胞的蛋白质合成过程中,能够阻止蛋白质的延伸阶段,从而抑制蛋白质的合成。
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G-418 disulfate的生物活性
体外
G418是许多原核和真核生物的抑制剂,浓度为1-300微克/毫升。由编码氨基糖苷类3'-磷酸转移酶的Tn5的neo基因对G418的抗性,APT 3'II通常用于实验室研究以选择基因工程细胞。通常,对于细菌和藻类,使用5mg / L或更低的浓度,对于哺乳动物细胞,使用约400mg / L的浓度进行选择,使用200mg / L进行维持。抗性克隆的选择可能需要1到3周
体内
连续三天G418(40和80 mg / kg)足以消除感染小鼠中所有未转染的布氏疱疹病毒寄生虫。
G-418 disulfate的实验参考方法
Animal Administration
为了表征锥虫群体对G418的体内敏感性,布氏布鲁氏菌GUTat 3.1和布氏布鲁氏菌GUTat 3.1 / BBR3的血流形式在亚致死辐射的小鼠中分别扩增。在寄生虫血症的第一个峰之前,收集锥虫,并将含有106个锥虫的等分试样腹膜内接种到小鼠中。感染后24小时,将小鼠分成组,并通过腹膜内接种0.2mL药物,以10,20,30,40,50或80mg / kg体重(bw)的剂量用G418处理。在无菌水中。在第一次治疗后24和48小时,以与之前相同的剂量向每组动物施用G418,导致每只小鼠进行三次处理。必须重复药物治疗以确保完全消除未转染的GUTat 3。来自小鼠的1个寄生虫。然后通过显微镜检查湿血膜每天监测小鼠33天,以检测寄生虫的存在。记录发现寄生虫的动物,然后从实验中取出。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。