PTC-209是BMI-1抑制剂

    PTC-209是一种特异性的 BMI-1 抑制剂，IC50 为 0.5 μM。

 

    MCE的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务

 

    体外

 

    PTC-209是最近开发的BMI1抑制剂，用于胆道癌（BTC）细胞。PTC-209以剂量依赖性方式（0.04-20μM）降低BTC细胞系的总体活力。用PTC-209处理导致半胱天冬酶活性略微增强并且细胞增殖停止。细胞周期分析显示PTC-209在G1 / S检查点导致细胞周期停滞。PTC-209（100,200或500 nM）降低BMI1并增加犬OSA细胞系中p16蛋白的表达。与载体对照相比，在500nM PTC-209处理后，Abrams和D17细胞系中BMI1蛋白表达分别降低40％和25％。在载体对照中，在Moresco细胞系中，分别在200nM和500nM PTC-209处理后BMI1蛋白表达降低了16％和39％。所有细胞系中均可观察到p16蛋白水平的增加，从100 nM PTC-209开始，在艾布拉姆斯（增加120％）和Moresco（增加200％）的500 nM PTC-209剂量下最高，但看起来很高D17细胞系为200 nM（增加54％）。

 

    体内

 

    药代动力学分析表明，PTC-209（60mg / kg，皮下每天一次）有效抑制体内肿瘤组织中BMI-1的产生。用PTC-209抑制BMI-1会阻止体内预先建立的肿瘤的生长。

 

    实验参考方法

 

    细胞分析

 

    在单独处理PTC-209和与Dox或Carbo组合处理后，MTT测定用于评估Abrams，D17和Moresco犬OSA细胞的增殖。将500个细胞接种在含有DMEM / 10％FBS的96孔板中，并使其粘附过夜（16-18小时）。对于单次处理PTC-209实验，将细胞与药物一起孵育72小时，终浓度为0,200,300,400,500和600nM。对于组合治疗实验，将细胞与药物一起孵育72小时，浓度如下：PTC-209（0,100,200和500nM），Dox（0,3和30nM），Carbo（0 ，3和30μM）。载体对照包括DMSO（PTC-209），0.9％盐水（Dox）和水（Carbo）。另外的对照包括单独的未处理（UT）细胞（无载体或药物）和含有培养基（DMEM / 10％FBS）的孔（以评估背景吸光度）。简单地说，在最终浓度下将MTT溶液添加到每个孔中。0.5mg / mL，在37℃下培养4小时。加入200uL DMSO以溶解甲crystals晶体，并使用分光光度计（Spectramax 190）在570nM和630nM（参考波长）下测量吸光度。每组6个孔用于PTC-209单一处理实验，每组4个孔用于组合处理实验，所有实验重复两次。使用双因素ANOVA和Tukey多重比较检验进行统计学分析。每组4个孔用于组合处理实验，所有实验重复两次。使用双因素ANOVA和Tukey多重比较检验进行统计学分析。每组4个孔用于组合处理实验，所有实验重复两次。使用双因素ANOVA和Tukey多重比较检验进行统计学分析。

 

    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

 

    Animal Administration

 

    小鼠

 

    对于小鼠在体内给予药物的实验，将肿瘤细胞皮下注射到裸鼠（雄性，8-10周龄）中，当肿瘤达到约0.2cm 3体积时，PTC-209每天一次以60mg / kg体重的剂量皮下给药（对照动物接受等体积的载体，14％DMSO，36％聚乙二醇400和50％聚丙二醇）。每3-7天记录肿瘤体积测量值直至达到终点。

 

    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。