Nutlin 3分子量
2019-05-30 
MCE小分子
Nutlin 3 是一种有效的 p53-MDM2 抑制剂，Ki 为 90 nM
Nutlin 3的分子量：581.49
体外
Nutlin 3是MDM2-p53相互作用的抑制剂。特别是，用1μM的Inauhzin和2μM的Nutlin 3共同处理p53阳性HCT116细胞，通过其蛋白质水平以及其靶标p21，PUMA或切割的PARP水平测定更能显着激活p53。 凋亡。 Nutlin 3是一种小分子抑制剂，可抑制MDM2与p53的结合以及随后的p53依赖性DNA损伤信号传导。作为单一药剂，Nutlin 3（2-10μM）稳定p53和p21WAF水平，对WTp53-22RV1细胞有毒性（IC50,4.3μM），但对p53缺陷细胞的毒性极小（IC50，>10μM）。 Nutlin 3在22RV1细胞中以剂量依赖性方式诱导p53和p21WAF表达。短期细胞周期测定显示，在10μM的剂量下，Nutlin 3略微增加G1期部分并降低所有三种细胞系的S期部分。
体内
Nutlin 3可以抑制源自人骨肉瘤或白血病细胞的异种移植肿瘤的生长，即使在每次口服200mg / kg的剂量下，Nutlin 3的抗肿瘤活性在HCT116衍生的异种移植肿瘤模型中也是微不足道的。Nutlin 3可能是一种有用的辅助手段，可以使用针对缺氧细胞的精确放疗来提高治疗率，并保证在体内进一步研究
实验参考方法
细胞分析
使用人非小细胞肺癌野生型p53含有H460和A549，人非小细胞肺癌p53无效H1299和人结肠癌HCT116（p53 + / +和p53 - / - ）细胞。将细胞（1.5×105）接种到6孔板中，并在37℃下孵育过夜。在指定浓度下处理Inauhzin和Nutlin 3 48小时后，收获细胞，在-20℃下在70％冰冷的乙醇中固定过夜，重悬于碘化丙啶溶液（50μg/ mL PI，0.1mg / ml）中。将mL RNase A，0.05％Tritin X-100（PBS）在37°C下孵育40分钟，然后使用流式细胞仪和专有软件分析DNA含量。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。
Animal Administration
小鼠
使用5周龄雌性SCID小鼠。在右侧腹部皮下接种3×106个HCT116p53 + / +细胞，用卡尺监测肿瘤生长。 在平均肿瘤体积达到50-100mm 3后，给动物腹膜内注射Inauhzin（IP），口服Nutlin 3或载体（4％DMSO用于Inauhzin，EtOH：Tween：5％葡萄糖= 5：5：90用于Nutlin 3）。每隔一天测量肿瘤体积，并在治疗的最后一天计算肿瘤生长抑制（T / C）。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考
Nutlin 3的分子量：581.49
体外
Nutlin 3是MDM2-p53相互作用的抑制剂。特别是，用1μM的Inauhzin和2μM的Nutlin 3共同处理p53阳性HCT116细胞，通过其蛋白质水平以及其靶标p21，PUMA或切割的PARP水平测定更能显着激活p53。 凋亡。 Nutlin 3是一种小分子抑制剂，可抑制MDM2与p53的结合以及随后的p53依赖性DNA损伤信号传导。作为单一药剂，Nutlin 3（2-10μM）稳定p53和p21WAF水平，对WTp53-22RV1细胞有毒性（IC50,4.3μM），但对p53缺陷细胞的毒性极小（IC50，>10μM）。 Nutlin 3在22RV1细胞中以剂量依赖性方式诱导p53和p21WAF表达。短期细胞周期测定显示，在10μM的剂量下，Nutlin 3略微增加G1期部分并降低所有三种细胞系的S期部分。
体内
Nutlin 3可以抑制源自人骨肉瘤或白血病细胞的异种移植肿瘤的生长，即使在每次口服200mg / kg的剂量下，Nutlin 3的抗肿瘤活性在HCT116衍生的异种移植肿瘤模型中也是微不足道的。Nutlin 3可能是一种有用的辅助手段，可以使用针对缺氧细胞的精确放疗来提高治疗率，并保证在体内进一步研究
实验参考方法
细胞分析
使用人非小细胞肺癌野生型p53含有H460和A549，人非小细胞肺癌p53无效H1299和人结肠癌HCT116（p53 + / +和p53 - / - ）细胞。将细胞（1.5×105）接种到6孔板中，并在37℃下孵育过夜。在指定浓度下处理Inauhzin和Nutlin 3 48小时后，收获细胞，在-20℃下在70％冰冷的乙醇中固定过夜，重悬于碘化丙啶溶液（50μg/ mL PI，0.1mg / ml）中。将mL RNase A，0.05％Tritin X-100（PBS）在37°C下孵育40分钟，然后使用流式细胞仪和专有软件分析DNA含量。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。
Animal Administration
小鼠
使用5周龄雌性SCID小鼠。在右侧腹部皮下接种3×106个HCT116p53 + / +细胞，用卡尺监测肿瘤生长。 在平均肿瘤体积达到50-100mm 3后，给动物腹膜内注射Inauhzin（IP），口服Nutlin 3或载体（4％DMSO用于Inauhzin，EtOH：Tween：5％葡萄糖= 5：5：90用于Nutlin 3）。每隔一天测量肿瘤体积，并在治疗的最后一天计算肿瘤生长抑制（T / C）。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考
