NB-598抑制剂

　　NB-598是鲨烯环氧化酶（SE）竞争性抑制剂，能抑制甘油三酯的生物合成。

 

　　MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报，我们不为任何个人用途提供产品和服务

 

　　生物活性

 

　　体外研究

 

　　NB598（10 μM）导致 MIN6 细胞总胆固醇水平减少 36±7%。NB598 分别从 PM、ER 和 SG 中显著降低胆固醇，减少幅度为 49±2%、46±7% 和 48±2%。在基础（1 mM 葡萄糖）和葡萄糖刺激（16.7 mM 葡萄糖）条件下，NB598 以剂量依赖的方式抑制胰岛素分泌。NB598 在高达 10 μM 的浓度下不会影响峰值外向 KV 电流或激活的电压依赖性，但会增加电流失活[1]。NB-598（10 μM）抑制从 [14C]乙酸盐合成甾醇和甾醇酯，而不影响其他脂质如磷脂（PL）、游离脂肪酸（FFA）和三酰甘油（TG）的合成。在缺乏外源性脂质体胆固醇的情况下，NB-598 可使 ACAT 活性降低 31%。即使在 600 PM 脂质体胆固醇的存在下，NB-598 也可使 ACAT 活性降低 22%[2]。NB-598 抑制 HepG2 细胞向培养基分泌胆固醇和三酰甘油[3]。

 

　　MCE 并未独立确认这些方法的准确性。这些方法仅供参考。

 

　　实验参考方法

 

　　激酶测定[2]

 

　　Caco-2 细胞在 58 cm² 的塑料培养皿中用培养基 A 培养 13 天。细胞用培养基 B 洗涤，然后用含有胆固醇胶束和每种化合物的培养基 B 进行培养。化合物溶解于 Me2SO，Me2SO 的最终浓度为 0.1%（v/v）。经过 18 小时的培养后，细胞用磷酸盐缓冲液（PBS）彻底洗涤，以去除化合物。按照上述方法制备微粒体。反应混合物（0.2 mL）由 0.1 mg 微粒体、0.25% BSA 和 40 PM [14C]油酸酰辅酶 A 在缓冲液 A 中组成。为避免内源性胆固醇的影响，向反应混合物中添加脂质体（胆固醇与磷脂酰胆碱比例为 2:1）[15]。微粒体在有或没有外源性胆固醇的情况下预孵育 1 小时，并按照上述方法测定 ACAT 活性。

 

　　MCE 并未独立确认这些方法的准确性。这些方法仅供参考。

 

　　参考文献

 

　　[1]. Xia F, et al. Inhibition of cholesterol biosynthesis impairs insulin secretion and voltage-gated calcium channel function in pancreatic beta-cells. Endocrinology. 2008 Oct;149(10):5136-45.

 

　　[2]. Horie M, et al. Effects of NB-598, a potent squalene epoxidase inhibitor, on the apical membrane uptake of cholesterol and basolateral membrane secretion of lipids in Caco-2 cells. Biochem Pharmacol. 1993 Jul 20;46(2):297-305.

 

　　[3]. Horie M, et al. An inhibitor of squalene epoxidase, NB-598, suppresses the secretion of cholesterol and triacylglycerol and simultaneously reduces apolipoprotein B in HepG2 cells. Biochim Biophys Acta. 1993 May 20;1168(1):45-51.