PARP抑制剂Olaparib中文名奥拉帕尼

　　Olaparib奥拉帕尼 (AZD2281; KU0059436) 是一种口服有效的 PARP 抑制剂，抑制 PARP-1 和 PARP-2 的 IC50 分别为 5 和 1 nM。奥拉帕尼Olaparib 是一种自噬 (autophagy) 和线粒体自噬 (mitophagy) 激活剂。

 

　　MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报，我们不为任何个人用途提供产品和服务

 

　　我们将采用定制合成服务的方式为您快速提供所需产品和技术服务

 

　　生物活性

 

　　体外研究

 

　　奥拉帕尼Olaparib (AZD2281) 是 PARP-1 和 PARP-2 的个位数纳摩尔抑制剂，对 BRCA1 缺陷型乳腺癌细胞系显示出独立的活性。将 Olaparib 应用于 SW620 细胞裂解物，确定 PARP-1 抑制的 IC50 约为 6 nM，PARP-1 活性的总消融浓度为 30 100 nM[1]。

 

　　体内研究

 

　　携带 SW620 异种移植肿瘤的动物用奥拉帕尼 Olaparib (10 mg/kg，口服，每天 1 次，共 5 天) 与 NSC 362856 (TMZ) (50 mg/kg，口服) 联合处理抗肿瘤[1]。Olaparib 增加在 DWC 模型中建立的 Calu-6 肿瘤的血管灌注。Olaparib奥拉帕尼 (50 mg/kg，口服) 作为单一药物或与放疗联合使用导致 Calu-6 肿瘤的荧光强度增加[2]。 相关产品推荐：XAV-939 (GMP) 抑制剂

 

　　实验参考方法

 

　　激酶测定[1]

 

　　该测定确定了奥拉帕利Olaparib抑制PARP-1酶活性的能力。PARP-2活性抑制通过使用PARP-1测定的变体来测量，其中PARP-2蛋白（重组）被特异性PARP-2抗体结合在96孔白色壁板中。添加3H-NAD+ DNA后测量PARP-2活性。在清洗后，添加闪烁剂以测量3H标记的核糖基化。对于tankyrase-1，开发了一种AlphaScreen测定，在此测定中，带HIS标签的重组TANK-1蛋白与生物素化的NAD+在384孔ProxiPlate测定中孵育。添加Alpha珠子以结合HIS和生物素标签以创建接近信号，而TANK-1活性的抑制与该信号的丧失成正比。所有实验至少重复三次[1]。

 

　　细胞测定[1]

 

　　PF50值是增敏因子，计算为控制生长的烷基化剂甲基甲磺酸盐（MMS）的IC50与与PARP抑制剂联合使用的MMS的IC50之比。使用HeLa B细胞，并且在筛选MMS时，奥拉帕利Olaparib在固定的200 nM浓度下测试。对于在SW620结肠癌细胞系中测试奥拉帕利，使用的浓度为1、3、10、100和300 nM。通过使用苏尔法罗达明B（SRB）测定评估细胞生长[1]。

 

　　动物给药[2]

 

　　小鼠[2]

 

　　带有220-250 mm³肿瘤的小鼠随机分为4个治疗组（n=5）：A；载体对照（10% DMSO在PBS中/10% 2-羟基丙基-β-环状糊精，每天口服灌胃5天），B；奥拉帕利（每天口服灌胃50 mg/kg，持续5天），C；10 Gy分次放疗（每天2 Gy，持续5天），D；Olaparib奥拉帕利和10 Gy（5×2 Gy）分次放疗（在每天2 Gy放疗的前30分钟给予奥拉帕利）。每天测量肿瘤体积，直到达到1000 mm³。计算每个个体肿瘤从治疗开始到体积增长四倍的天数（相对肿瘤体积×4；RTV4）。

 

　　MCE未独立确认这些方法的准确性，仅供参考。

 

　　参考文献

 

　　[1]. Menear KA, et al. 4-[3-(4-cyclopropanecarbonylpiperazine-1-carbonyl)-4-fluorobenzyl]-2H-phthalazin-1-one: a novel bioavailable inhibitor of poly(ADP-ribose) polymerase-1. J Med Chem. 2008 Oct 23;51(20):6581-91

 

　　[2]. Senra JM, et al. Inhibition of PARP-1 by olaparib (AZD2281) increases the radiosensitivity of a lung tumor xenograft.Mol Cancer Ther. 2011 Oct;10(10):1949-58.

 

　　[3]. Yasukawa M, et al. Synergetic Effects of PARP Inhibitor AZD2281 in Oral Squamous Cell Carcinoma in Vitro and in Vivo. Int J Mol Sci. 2016 Feb 24;17(3):272.

 

　　[4]. Bian X, et al. PTEN deficiency sensitizes endometrioid endometrial cancer to compound PARP-PI3K inhibition but not PARP inhibition as monotherapy. Oncogene. 2018 Jan 18;37(3):341-351.