CA-074 methyl ester是组织蛋白酶B抑制剂

　　CA-074 methyl ester 是一种特异性的 Cathepsin B 抑制剂，具有保护神经，抗癌、抗炎等多种生物活性。

 

　　MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报，我们不为任何个人用途提供产品和服务

 

　　CA-074 methyl ester是组织蛋白酶B抑制剂的生物活性

 

　　体外研究

 

　　CA-074Me (5 μM 和 50 μM) 抑制来自 C57BL/6J 和 NOD/ShiLtJ 小鼠的 BMM 细胞中 RANKL 诱导的破骨细胞生成。CA-074Me 在体外 RANKL 刺激后 24 小时内发挥其抗破骨细胞作用。CA-074Me 不通过 MAPK-ERK 信号级联发挥其抗破骨细胞作用。CA-074Me 抑制 RANKL 刺激后的 c-FOS 上调和随后的 NFATc1 自身扩增。

 

　　CA-074Me 减少 CVB1诱导的细胞凋亡。

 

　　体内研究

 

　　处理前和处理后，CA074-me (1 μg、10 μg) 可预防全脑 I/R 损伤诱导的海马 CA1 神经元程序性坏死。溶酶体膜的破裂和组织蛋白酶-B 的渗漏，这被 CA074-me 预处理强烈抑制。RIP3的过表达和核转位以及I/R损伤后NAD+水平的降低也受到抑制，同时CA074-me预处理增强了Hsp70的上调。

 

　　CA-074Me (30 mg/kg) 在体内能够抑制破骨细胞生成和骨降解。

 

　　在 CVB+CA-074Me (4 mg/kg/day im) 豚鼠组中，与 CVB+None 组相比，炎症评分显著降低。与假手术组相比，CVB+CA-074Me组CD8+T细胞数量减少。

 

　　实验参考方法

 

　　激酶测定

 

　　在细胞培养和破骨细胞生成经过七天后，将培养基去除，并用PBS洗涤三次。使用制造商提供的固定溶液固定BMMs。将细胞在含有去离子水、快速石榴石GBC、萘磷酸盐、乙酸和酒石酸的溶液中孵育37°C 1小时。去除染色溶液，用PBS洗涤（3次），然后晾干。使用光学显微镜计数整个培养区域内具有三个或更多核的TRAP阳性细胞，作为多核破骨细胞。

 

　　动物给药

 

　　RANKL（0.08 mg/kg）与CA-074Me（10 mg/kg或30 mg/kg）混合在无菌、非免疫原性的1% Extracel-HP凝胶中。该凝胶由硫醇修饰的透明质酸钠、硫醇修饰的肝素、硫醇修饰的明胶和脱气去离子无菌水组成。在无菌操作台上，使用无菌注射器制备凝胶混合物。对照组假性凝胶中只含有无菌磷酸缓冲盐溶液（PBS），不含任何细胞因子。将骨吸收组给予0.08 mg/kg RANKL的凝胶以诱导病理性骨丢失。在无菌操作台上，将仅含凝胶、凝胶-RANKL和凝胶-RANKL-CA-074Me混合物注射到8周龄雄性小鼠的顶骨中（n = 5），术前进行全身麻醉（80 mg/kg氯胺酮和7 mg/kg二甲苯胺）。四天后，取出颅骨，用4%甲醛固定24小时，用20% EDTA脱钙一周，然后从石蜡块中切片。切片经过酒石酸抗酸磷酸酸酶（TRAP）染色以鉴定破骨细胞。

 

　　MCE没有独立确认这些方法的准确性，仅供参考。