3-Methyladenine是 PI3K 的抑制剂

    3-Methyladenine是 PI3K 的抑制剂。它通过抑制class III PI3K广泛作为自噬 (autophagy) 的抑制剂使用。

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    生物活性

    体外

    3-甲基腺嘌呤在体外显示出与Vps34结合的轻微偏好，Vps34的IC50为25μM，而PtdIns3Kγ的IC50为60μM，而3-甲基腺嘌呤（10mM）可抑制所有PtdIns3Ks。 3-甲基腺嘌呤（3-MA，5mM）在无葡萄糖条件和正常条件下抑制HeLa细胞中的自噬。 3-甲基腺嘌呤（2.5,5或10mM）诱导HeLa细胞中半胱天冬酶依赖性细胞死亡，并且死亡的发生与抑制自噬无关。 此外，3-甲基腺嘌呤（3-MA，1 mM）显着缩短了诺考达唑诱导的前中期停滞的持续时间。相关产品推荐：乙酰半胱氨酸Acetylcysteine粘液溶解剂

   在体外细胞培养实验中，3-MA 常用的浓度为 0.5-10 mM，所以优先推荐直接称取本次实验所需粉末量，用培养基完全溶解，0.22 μm 过滤器过滤除菌之后使用。建议溶液现配现用，尽快用完。

    体内

    3-甲基腺嘌呤（1.5mg / 100g，腹膜内注射）治疗在12和24小时减轻大鼠中牛磺胆酸钠诱导的重症急性胰腺炎（SAP）。 3-甲基腺嘌呤抑制牛磺胆酸钠诱导的SAP中胰腺腺泡细胞的自噬。 3-甲基腺嘌呤还显示牛磺胆酸钠诱导的SAP对PI3K / Akt信号通路和NF-κB信号通路的抑制作用

    实验参考方法

    细胞分析

    通过台盼蓝排除测定法测定细胞活力。 在含有3-甲基腺嘌呤的培养基中培养细胞。 收集粘附和漂浮的细胞并悬浮在磷酸盐缓冲盐水（PBS，pH7.4）中，最终密度为1-2×106 / mL。 将等体积的0.4％台盼蓝溶液（w / v，在PBS中）加入细胞悬浮液中并充分混合。 在室温下孵育3分钟后，使用血细胞计数器进行细胞计数。

    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。

    动物研究

    所有大鼠禁食12小时，在手术前自由饮水。 通过腹膜内（i.p.）注射2％戊巴比妥钠（0.25mL / 100g）麻醉后，将它们放置并固定在桌子上，常规剃毛，消毒和覆盖。 以0.1mL / min的速度诱导大鼠SAP模型，在剖腹术后将新鲜制备的3.5％牛磺胆酸钠溶液（0.1mL / 100g）均匀逆行输注到胆胰管中。 在假手术（SO）对照组中，用等体积的生理盐水溶液代替3.5％牛磺胆酸钠溶液。 用连续的3-0-丝缝合线封闭切口，并将2mL / 100g盐水皮下注射到背部以补偿液体损失。 将180只大鼠随机分为4组：（1）刺五加处理组（Aca组，n = 45），通过静脉成功建模后3小时以3.5 mg / 100 g剂量注射0.2％刺五加注射液。 caudalis曾经知道这个剂量是有效的; （2）3-甲基腺嘌呤治疗组（3-甲基腺嘌呤组，n = 45），其中大鼠在通过腹膜内途径成功建模后3小时以1.5mg / 100g的剂量注射100nmol /μL的3-甲基腺嘌呤溶液 一旦知道这个剂量是有效的; （3）SAP模型组（SAP组，n = 45），其中这些大鼠在通过尾静脉成功建模3小时后接受等量的生理盐水代替刺五加注射; （4）SO组（对照组，n = 45），其中这些大鼠在通过尾静脉一次成功假手术后3小时接受等量的生理盐水代替刺五加注射液。 将四组中的每组45只动物随机分成3,12和24小时亚组用于术后观察。