AZD1080抑制剂

　　AZD1080 是一种有效的选择性 GSK3 抑制剂。AZD1080 抑制重组人 GSK3α 和 GSK3β，pKi (IC50) 分别为 8.2 (6.9 nM) 和 7.5 (31 nM)。

 

　　MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报，我们不为任何个人用途提供产品和服务

 

　　我们将采用定制合成服务的方式为您快速提供所需产品和技术服务

 

　　生物活性

 

　　体外研究

 

　　AZD1080 对 cdk2 (pKi=5.9；1150 nM；37-fold)，cdk5 (pKi=6.4；429 nM；14-fold)，cdk1 (pKi=5.7；1980 nM；64 倍) 和 Erk2 (pKi<5；>10 μM；>323 倍)。还评估了 AZD1080 (在 10 μM 时) 的泛激酶选择性，并在 MDS Pharma 筛选中对 23 种激酶以及 65 种不同的受体、酶和离子通道显示出良好的总体选择性 (在 10 μM AZD1080 时效果 < 50%)。AZD1080 (IC50=324 nM) 和非选择性参考 GSK3 抑制剂 LiCl (IC50=1.5 mM) 观察到 tau 磷酸化的浓度依赖性抑制，表明 AZD1080 的效力比 LiCl 强几个数量级。

 

　　体内研究

 

　　口服后血液中的药代动力学分析表明，AZD1080 在大鼠体内具有良好的口服生物利用度 (15-24%)，半衰期为 7.1 小时，这使得 AZD1080 对进一步的体内试验具有吸引力。用 4 或 15 μMol/kg 的 AZD1080 进行亚慢性 (3 天) 口服处理可显著阻断 MK-801 诱导的记忆缺陷 (AZD1080 与 MK -801，4 μMol/kg 时 p<0.05 和 15 μMol 时 p<0.01/kg)，提出了这样的假设：可能需要更长时间的处理才能使突触有效发挥作用。

 

　　实验参考方法

 

　　激酶试验

 

　　GSK3β、Cdk2和Cdk5 Ki的测定采用闪烁接近法和动力学分析。GSK3α检测与GSK3β检测同时进行。用于计算GSKα Ki值的ATP KM值为10 μM。抑制Cdk1。用于计算Ki值的ATP KM值为51 μM。Erk2的活性使用Ser/Thr激酶SPA试剂盒、p42 MAPK激酶(20 U/孔)和生物素化的MBP来测定。用于计算Ki值的ATP KM值为71 μM。

 

　　MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。

 

　　动物实验

 

　　小鼠

 

　　选用雄性C57BL/6小鼠161只，8-12周龄。这些动物被饲养在常规的笼子里(每笼3-5只老鼠)，随意喂食标准的啮齿动物咀嚼物和自来水。通常每个实验组包括9-12只小鼠，卫星组包括2-4只小鼠(测定血浆和脑中的化合物暴露，见下文)。AZD1080(4.0或15 μmol/kg)或载药(含0.5%抗坏血酸、0.01% EDTA、pH 2.0的水)急性或亚慢性灌胃(10 mL/kg)(每日2次)，连续3天。训练试验在最终给药AZD1080后1.5、3或5小时进行。为了扰乱学习，小鼠皮下注射MK-801(0.1或0.15 mg/kg;(+)可。801马来酸氢)或载药(生理盐水)在训练试验前30分钟。

 

　　大鼠

 

　　选用成年雄性Sprague-Dawley大鼠71只(250 ~ 300 g)。AZD1080急性剂量(1、3或10 μmol/kg)或载药(0.5%抗坏血酸水，0.01% EDTA, pH 2.0)灌胃(给药量5 mL/kg)。在给药后1、2、3、6或24小时，对大鼠进行麻醉，并在肝素微容器管中抽取腹主动脉的血液。外周血单核细胞(PBMC)从血液样本中分离出来。分离的血液样本用于血浆处理和随后的生物分析。

 

　　MCE尚未独立证实这些方法的准确性。仅供参考。