Docetaxel
2019-03-26 
MCE小分子
Docetaxel是一种抗肿瘤药，主要作用机制是抑制微管 (microtubule) 解聚，以及减弱 Bcl-2 和 Bcl-xL 基因表达的作用。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
体外
多西紫杉醇（DOC）和葡磷酰胺（GLU）单一和联合治疗以剂量依赖性方式影响细胞活力。 PC-3和LNCaP细胞中GLU的IC50为70±4μM和86.8±8μM; 分别。 而在PC-3和LNCaP细胞中，单独的多西紫杉醇的IC50为3.08±0.4nM和1.46±0.2nM。 分别。 发现GLU与多西紫杉醇的共同处理使细胞毒性协同作用，并且在PC-3和LNCaP细胞中IC 50值降低至2.7±0.1nM和0.75±0.3nM。 分别。 NCI-H460在24小时时对多西紫杉醇的IC50为116nM，在72小时时为30nM。 根据DTP数据搜索报道的数据，NCI-60细胞组对多西紫杉醇的平均IC50为14-34 nM。
体内
在雌性小鼠中，在（HALO）组照射后14小时内多西紫杉醇诱导的肠细胞凋亡显着大于2-HALO组。 多西紫杉醇在2-HALO组中Bax表达显着升高，但在14-HALO组中没有。 另一方面，多西紫杉醇在14-HALO组中显着提高了裂解的Caspase-3表达，但在2-HALO组中没有。 在14 HALO给予多西紫杉醇后，Wee1和磷酸化CKD1的表达显着升高，而在2 HALO则没有。 此外，多西紫杉醇显着降低14-HALO组中的存活蛋白表达，但不显着降低2-HALO组中的存活蛋白表达。 多西紫杉醇处理的14-HALO组中的存活蛋白表达水平显着小于药物处理的2-HALO组。 胡椒碱（PIP）通过3.5mg / kg静脉推注和35mg / kg和3.5mg / kg口服给药，而多西紫杉醇（DOX）以7mg / kg静脉推注给予Sprague-Daley大鼠。 在Sprague-Dawley大鼠中通过口服施用35mg / kg的PIP和通过静脉内推注施用7mg / kg的多西紫杉醇共同施用。 PIP和多西他赛的联合使用导致其体内暴露的协同增加
Docetaxel溶剂和溶解度
体内：
1、逐个加入每种溶剂：10％DMSO 90％玉米油
溶解度：≥2.5mg / mL（3.09 mM）; 明确解决方案
2、逐个添加每种溶剂：10％DMSO 90％（20％SBE-β-CD在盐水中）
溶解度：≥2.5mg / mL（3.09 mM）; 明确解决方案
3、逐个添加每种溶剂：10％DMSO 40％PEG300 5％Tween-80 45％盐水
溶解度：≥2.5mg / mL（3.09 mM）; 明确解决方案
Docetaxel实验参考方法
细胞分析
评估单药浓度 - 反应曲线。 在96孔板中，对于PC-3和LNCaP，以2,000个细胞/孔的密度进行接种。 用不同药物浓度的每种单一药物及其组合处理细胞72小时。 多西紫杉醇的浓度为0.1-1,000nM。 GLU的使用浓度为0.1-300μm。 使用SRB测定在药物暴露结束时评估细胞毒性。 暴露72小时后，将细胞用10％三氯乙酸（150μL）在4℃下固定1小时。 然后，将细胞在室温下染色10分钟，其中0.4％SRB溶于1％乙酸中。 然后将板空气干燥24小时，并在摇床上以1,600rpm使染料用150μLTris（10mM，PH7.4）溶解5分钟。 然后使用酶标仪在545nM下测量吸光度。 结果表示为与对照相比的吸光度的相对百分比。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
小鼠
使用5周龄雄性Balb / c小鼠。 对于小鼠，每周一次给予多西紫杉醇（0,10,20,30,40,60和80mg / kg /周），持续3周。 因为每周多于3??0mg / kg的多西紫杉醇导致小鼠体重减轻，所以每周20mg / kg的多西紫杉醇被认为是最大的无毒剂量。 多西紫杉醇（每周20mg / kg）每周一次给予小鼠，持续3周，在以下不同点之一（2,10,14或22个HALO）。 在最后一剂给药后72小时，取出小肠的肠粘膜（近端8cm），固定在20N Mildform溶液（在缓冲溶液中含有8％甲醛）中，并包埋在石蜡块中， 将5μm的切片放在载玻片上。 使用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）方法，使用Apop标签过氧化物酶原位凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡。
大鼠
使用体重在230-250g和年龄在6-7周之间的雄性Sprague-Dawley大鼠。 将约25只SD大鼠分成5组，分别接受多西紫杉醇（7mg / kg，静脉注射），PIP（35mg / kg，口服）和它们的联合给药（DOX + PIP）以及PIP（3.5mg / kg，口服）。 和PIP（3.5 mg / kg，iv）。 在药物施用前一天，通过肌内注射含有60mg / kg氯胺酮和6mg / kg甲苯噻嗪（注射体积，0.2mL）的混合物麻醉大鼠。 右侧颈静脉插入聚乙烯管（0.5 mm内径，1 mm）进行血液采集。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
体外
多西紫杉醇（DOC）和葡磷酰胺（GLU）单一和联合治疗以剂量依赖性方式影响细胞活力。 PC-3和LNCaP细胞中GLU的IC50为70±4μM和86.8±8μM; 分别。 而在PC-3和LNCaP细胞中，单独的多西紫杉醇的IC50为3.08±0.4nM和1.46±0.2nM。 分别。 发现GLU与多西紫杉醇的共同处理使细胞毒性协同作用，并且在PC-3和LNCaP细胞中IC 50值降低至2.7±0.1nM和0.75±0.3nM。 分别。 NCI-H460在24小时时对多西紫杉醇的IC50为116nM，在72小时时为30nM。 根据DTP数据搜索报道的数据，NCI-60细胞组对多西紫杉醇的平均IC50为14-34 nM。
体内
在雌性小鼠中，在（HALO）组照射后14小时内多西紫杉醇诱导的肠细胞凋亡显着大于2-HALO组。 多西紫杉醇在2-HALO组中Bax表达显着升高，但在14-HALO组中没有。 另一方面，多西紫杉醇在14-HALO组中显着提高了裂解的Caspase-3表达，但在2-HALO组中没有。 在14 HALO给予多西紫杉醇后，Wee1和磷酸化CKD1的表达显着升高，而在2 HALO则没有。 此外，多西紫杉醇显着降低14-HALO组中的存活蛋白表达，但不显着降低2-HALO组中的存活蛋白表达。 多西紫杉醇处理的14-HALO组中的存活蛋白表达水平显着小于药物处理的2-HALO组。 胡椒碱（PIP）通过3.5mg / kg静脉推注和35mg / kg和3.5mg / kg口服给药，而多西紫杉醇（DOX）以7mg / kg静脉推注给予Sprague-Daley大鼠。 在Sprague-Dawley大鼠中通过口服施用35mg / kg的PIP和通过静脉内推注施用7mg / kg的多西紫杉醇共同施用。 PIP和多西他赛的联合使用导致其体内暴露的协同增加
Docetaxel溶剂和溶解度
体内：
1、逐个加入每种溶剂：10％DMSO 90％玉米油
溶解度：≥2.5mg / mL（3.09 mM）; 明确解决方案
2、逐个添加每种溶剂：10％DMSO 90％（20％SBE-β-CD在盐水中）
溶解度：≥2.5mg / mL（3.09 mM）; 明确解决方案
3、逐个添加每种溶剂：10％DMSO 40％PEG300 5％Tween-80 45％盐水
溶解度：≥2.5mg / mL（3.09 mM）; 明确解决方案
Docetaxel实验参考方法
细胞分析
评估单药浓度 - 反应曲线。 在96孔板中，对于PC-3和LNCaP，以2,000个细胞/孔的密度进行接种。 用不同药物浓度的每种单一药物及其组合处理细胞72小时。 多西紫杉醇的浓度为0.1-1,000nM。 GLU的使用浓度为0.1-300μm。 使用SRB测定在药物暴露结束时评估细胞毒性。 暴露72小时后，将细胞用10％三氯乙酸（150μL）在4℃下固定1小时。 然后，将细胞在室温下染色10分钟，其中0.4％SRB溶于1％乙酸中。 然后将板空气干燥24小时，并在摇床上以1,600rpm使染料用150μLTris（10mM，PH7.4）溶解5分钟。 然后使用酶标仪在545nM下测量吸光度。 结果表示为与对照相比的吸光度的相对百分比。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
小鼠
使用5周龄雄性Balb / c小鼠。 对于小鼠，每周一次给予多西紫杉醇（0,10,20,30,40,60和80mg / kg /周），持续3周。 因为每周多于3??0mg / kg的多西紫杉醇导致小鼠体重减轻，所以每周20mg / kg的多西紫杉醇被认为是最大的无毒剂量。 多西紫杉醇（每周20mg / kg）每周一次给予小鼠，持续3周，在以下不同点之一（2,10,14或22个HALO）。 在最后一剂给药后72小时，取出小肠的肠粘膜（近端8cm），固定在20N Mildform溶液（在缓冲溶液中含有8％甲醛）中，并包埋在石蜡块中， 将5μm的切片放在载玻片上。 使用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）方法，使用Apop标签过氧化物酶原位凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡。
大鼠
使用体重在230-250g和年龄在6-7周之间的雄性Sprague-Dawley大鼠。 将约25只SD大鼠分成5组，分别接受多西紫杉醇（7mg / kg，静脉注射），PIP（35mg / kg，口服）和它们的联合给药（DOX + PIP）以及PIP（3.5mg / kg，口服）。 和PIP（3.5 mg / kg，iv）。 在药物施用前一天，通过肌内注射含有60mg / kg氯胺酮和6mg / kg甲苯噻嗪（注射体积，0.2mL）的混合物麻醉大鼠。 右侧颈静脉插入聚乙烯管（0.5 mm内径，1 mm）进行血液采集。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
