Chloroquine
2019-01-24 
MCE小分子
Chloroquine diphosphate是一种广泛用于治疗疟疾和类风湿性关节炎的抗疟疾和抗炎药。 Chloroquine 是 autophagy 和 toll-like receptors (TLRs) 的抑制剂。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
Chloroquine diphosphate的生物活性
体外
氯喹（CHQ，20μM）抑制IL-12p70释放并降低活化的人单核细胞衍生的朗格汉斯样细胞（MoLC）的Th1引发能力。 氯喹（CHQ，20μM）增强MoLC中IL-1诱导的IL-23分泌，随后通过引发的CD4 + T细胞增加IL-17A释放[1]。 氯喹（25μM）抑制亲本MDA-MB-231细胞中常氧和缺氧中的MMP-9mRNA表达。 氯喹对MMP-2，MMP-9和MMP-13 mRNA表达具有细胞，剂量和缺氧依赖性作用[2]。 使用IRS-954或氯喹抑制TLR7和TLR9可显着降低体外HuH7细胞的增殖[3]。
体内
氯喹（80 mg / kg，i.p。）不能阻止原位小鼠模型中具有高或低TLR9表达水平的三阴性MDA-MB-231细胞的生长[2]。 使用IRS-954或氯喹的TLR7和TLR9抑制显着抑制小鼠异种移植模型中的肿瘤生长。 DEN / NMOR大鼠模型中的HCC发育也被氯喹显着抑制
溶剂和溶解度
体外：
H2O：≥33mg / mL（63.97 mM）
DMSO：<1 mg / mL（不溶或微溶）
*“≥”表示可溶，但饱和度未知。
实验参考方法
细胞分析[2]
将细胞在载体或25或50μM氯喹存在下在具有正常培养基的6孔板中培养，直至接近汇合，之后用无菌磷酸盐缓冲盐水（PBS）冲洗并进一步培养指定的时间。 在无血清培养基中。 在所需的时间点，弃去培养基并在裂解缓冲液中快速收获细胞并通过离心澄清。 在还原十二烷基硫酸钠（SDS）样品缓冲液中煮沸上清液后，每道加载等量的蛋白质（100μg），将样品电泳到10或4-20％梯度聚丙烯酰胺SDS凝胶中，然后转移到硝酸纤维素膜上。 膜。 为了检测TLR9，将印迹在4℃下与抗TLR9抗体一起温育过夜，在含有0.1％（v / v）Tween-20（TBST）的Tris缓冲盐水中1：500稀释。 用多克隆兔抗肌动蛋白确认等量加载。 用辣根过氧化物酶连接的二抗进行二次检测。 使用ECL试剂盒通过化学发光使蛋白质条带可视化。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
将对照和TLR9 siRNA MDA-MB-231细胞（100μL中的5×10 5个细胞）接种到4周龄免疫缺陷小鼠（无胸腺裸/ nu Foxn1）的乳房脂肪垫中。 在肿瘤细胞接种后7天开始治疗。 每天用腹膜内（i.p.）氯喹（80mg / kg）或载体（PBS）处理小鼠。 每天监测动物的临床症状。 每周进行两次肿瘤测量，并根据公式V =（π/ 6）（d1×d2）3/2计算肿瘤体积，其中d1和d2是垂直肿瘤直径。 使肿瘤生长22天，此时处死小鼠并解剖肿瘤用于最终测量。 在整个实验中，将动物维持在受控制的无病原体环境条件下（20-21℃，30-60％相对湿度和12小时光照循环）。 给小鼠喂食小动物食物颗粒，随意提供无菌水。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考
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Chloroquine diphosphate的生物活性
体外
氯喹（CHQ，20μM）抑制IL-12p70释放并降低活化的人单核细胞衍生的朗格汉斯样细胞（MoLC）的Th1引发能力。 氯喹（CHQ，20μM）增强MoLC中IL-1诱导的IL-23分泌，随后通过引发的CD4 + T细胞增加IL-17A释放[1]。 氯喹（25μM）抑制亲本MDA-MB-231细胞中常氧和缺氧中的MMP-9mRNA表达。 氯喹对MMP-2，MMP-9和MMP-13 mRNA表达具有细胞，剂量和缺氧依赖性作用[2]。 使用IRS-954或氯喹抑制TLR7和TLR9可显着降低体外HuH7细胞的增殖[3]。
体内
氯喹（80 mg / kg，i.p。）不能阻止原位小鼠模型中具有高或低TLR9表达水平的三阴性MDA-MB-231细胞的生长[2]。 使用IRS-954或氯喹的TLR7和TLR9抑制显着抑制小鼠异种移植模型中的肿瘤生长。 DEN / NMOR大鼠模型中的HCC发育也被氯喹显着抑制
溶剂和溶解度
体外：
H2O：≥33mg / mL（63.97 mM）
DMSO：<1 mg / mL（不溶或微溶）
*“≥”表示可溶，但饱和度未知。
实验参考方法
细胞分析[2]
将细胞在载体或25或50μM氯喹存在下在具有正常培养基的6孔板中培养，直至接近汇合，之后用无菌磷酸盐缓冲盐水（PBS）冲洗并进一步培养指定的时间。 在无血清培养基中。 在所需的时间点，弃去培养基并在裂解缓冲液中快速收获细胞并通过离心澄清。 在还原十二烷基硫酸钠（SDS）样品缓冲液中煮沸上清液后，每道加载等量的蛋白质（100μg），将样品电泳到10或4-20％梯度聚丙烯酰胺SDS凝胶中，然后转移到硝酸纤维素膜上。 膜。 为了检测TLR9，将印迹在4℃下与抗TLR9抗体一起温育过夜，在含有0.1％（v / v）Tween-20（TBST）的Tris缓冲盐水中1：500稀释。 用多克隆兔抗肌动蛋白确认等量加载。 用辣根过氧化物酶连接的二抗进行二次检测。 使用ECL试剂盒通过化学发光使蛋白质条带可视化。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
将对照和TLR9 siRNA MDA-MB-231细胞（100μL中的5×10 5个细胞）接种到4周龄免疫缺陷小鼠（无胸腺裸/ nu Foxn1）的乳房脂肪垫中。 在肿瘤细胞接种后7天开始治疗。 每天用腹膜内（i.p.）氯喹（80mg / kg）或载体（PBS）处理小鼠。 每天监测动物的临床症状。 每周进行两次肿瘤测量，并根据公式V =（π/ 6）（d1×d2）3/2计算肿瘤体积，其中d1和d2是垂直肿瘤直径。 使肿瘤生长22天，此时处死小鼠并解剖肿瘤用于最终测量。 在整个实验中，将动物维持在受控制的无病原体环境条件下（20-21℃，30-60％相对湿度和12小时光照循环）。 给小鼠喂食小动物食物颗粒，随意提供无菌水。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考
