Hoechst 33342是DNA荧光染剂

Hoechst 33342 是 Hoechst 系列的标记染料。Hoechst 系列是活细胞核标记染料。Hoechst 通过结合 DNA 双链中的小沟而结合核酸。Hoechst 倾向于结合富含 A/T 的 DNA 链。同时，富含 A/T 的双链 DNA 使荧光强度显著增强。Hoechst 可穿过细胞膜，结合活细胞或固定细胞。Hoechst 染料的荧光强度随着溶液 pH 升高而增强。

 

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CAS No. : 23491-52-3

别名：bisBenzimide H 33342; HOE 33342

 

 

体外研究：

Hoechst 工作液的配制

1.1 制备储存液

用 DMSO 配制 1 mg/mL 的 Hoechst 储存液。

注：Hoechst 储存液建议分装后于 -4℃ 或 -20℃ 避光保存。

1.2 工作液的配制

用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，终浓度为 10 μg/mL Hoechst 工作液。

注：请根据实际情况调整 Hoechst 工作液浓度，且现用现配。

2. 细胞染色（悬浮细胞）

2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×106/mL

2.2 加入 1 mL Hoechst 工作液，室温孵育 3-10 分钟。

2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。

2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。

2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。

3. 细胞染色（贴壁细胞）

3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。

3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育 3-10 分钟。

3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。

 

 

注意事项

1. 请根据实际情况调整 Hoechst 工作液浓度。

2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。