MK-5108抑制剂

　　MK-5108是高效和特异性的极光激酶A抑制剂，IC50 值为0.064 nM。

 

　　MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报，我们不为任何个人用途提供产品和服务

 

　　我们将采用定制合成服务的方式为您快速提供所需产品和技术服务

 

　　MK-5108抑制剂的生物活性

 

　　体外研究

 

　　MK-5108 以 ATP 竞争性方式抑制 Aurora-A 活性，IC50 值为 0.064 nM。它对其他家族激酶 Aurora-B (220 倍) 和 Aurora-C (190 倍) 显示出强大的选择性。MK-5108 对 Aurora-A 的选择性也高于其他蛋白激酶。MK-5108 抑制 14 种细胞系的生长，IC50 值在 0.16 和 6.4 μM 之间。

 

　　体内研究

 

　　15 和 30 mg/kg 的 MK-5108 处理在 HCT116 肿瘤模型中导致显著的肿瘤生长抑制。MK-5108 在两种剂量下都具有良好的耐受性，体重减轻最小。MK-5108 在携带 SW48 肿瘤的裸鼠中也表现出显著的抗肿瘤活性。15 和 45 mg/kg 的 MK-5108 引起剂量依赖性肿瘤生长抑制，第 10 天的 %T/C 分别为 35% 和 7%，第 27 天的 %T/C 分别为 58% 和 32%。MK-5108 在裸鼠中耐受性良好，体重没有减轻，对血细胞有中度影响。

 

　　MK-5108抑制剂的实验参考方法

 

　　激酶检测

 

　　Aurora-A 检测反应在以下条件下进行：20 μM ATP，25 μM Tetra-Kemptide，每孔 1.0 μCi [γ-33P]-ATP，0.1 ng 每孔的 Aurora-A，50 mmol/L Tris-HCl (pH 7.4)，15 mmol/L Mg(OAc)2，以及 0.2 mmol/L EDTA，温度为 30°C，反应时间为 40 分钟。为了研究 MK-5108 对 Aurora-A 的抑制模式，在不同浓度 ATP 存在下测定 MK-5108 的 IC50 值。然后，将 IC50 值绘制为 ATP 浓度的函数，以分析 ATP 浓度对 MK-5108 IC50 值的影响。

 

　　细胞检测

 

　　将细胞接种到 96 孔板中，然后孵育过夜。添加含有 MK-5108、紫杉醇或 DMSO 对照的培养基，并孵育 72 小时。然后，使用 SpectraMax Plus384 板式读数仪通过 WST-8 比色法测量细胞密度。生成浓度反应曲线，以显示 MK-5108 和紫杉醇处理样本相对于 DMSO 处理对照的细胞密度下降情况。根据这些曲线确定生长抑制的 IC50 值。

 

　　MCE 尚未独立确认这些方法的准确性。这些仅供参考。

 

　　动物给药

 

　　大鼠: 在 8 天后，将 MK-5108 悬浮于 0.5% 甲基纤维素/0.24% SDS 中，口服给予，每日两次，持续 14 天。SW48 细胞悬浮于 50% Matrigel/50% PBS 中，皮下移植至裸鼠侧腹部。在 7 天后，将 MK-5108 悬浮于 0.5% 甲基纤维素/0.24% SDS 中，口服给予，每周 2 次，共持续 3 周。在 HeLa-luc 和 ES-2 双侧异种移植模型中，将 HeLa-luc 或 ES-2 细胞悬浮于 50% Matrigel 和 50% PBS 中，皮下移植至裸鼠的右侧或左侧腹部。在 8 天后，注射载体（5% 乙醇-生理盐水）或 7.5 mg/kg 紫杉醇。MK-5108 在紫杉醇注射后 24 小时口服给予，每日两次，为期 2 天。每个肿瘤的体积由肿瘤直径确定。

 

　　MK-5108抑制剂的溶解性数据

 

　　动物实验：

 

　　请根据您的 实验动物和给药方式 选择适当的溶解方案。

 

　　以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液，再依次添加助溶剂：

 

　　——为保证实验结果的可靠性，澄清的储备液可以根据储存条件，适当保存；体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；

 

　　以下溶剂前显示的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过加热和/或超声的方式助溶

 

　　方案 一

 

　　请依序添加每种溶剂： 10% DMSO  →  40% PEG300   →  5% Tween-80  →  45% Saline

 

　　Solubility: ≥ 1.25 mg/mL (2.71 mM); 澄清溶液

 

　　此方案可获得 ≥ 1.25 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。

 

　　以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 12.5 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；再向上述体系中加入 50 μL Tween-80，混合均匀；然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL。

 

　　生理盐水的配制：将 0.9 g 氯化钠，溶解于 ddH₂O 并定容至 100 mL，可以得到澄清透明的生理盐水溶液。

 

　　方案 二

 

　　请依序添加每种溶剂： 10% DMSO   →  90% (20% SBE-β-CD in Saline)

 

　　Solubility: ≥ 1.25 mg/mL (2.71 mM); 澄清溶液

 

　　此方案可获得 ≥ 1.25 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。

 

　　以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 12.5 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中，混合均匀。

 

　　2 g SBE-β-CD（磺丁基醚 β-环糊精）粉末定容于 10 mL 的生理盐水中，完全溶解至澄清透明。