Thioflavin T 硫黄素T

　　Thioflavin T 是一种阳离子 Benzothiazole 染料，在组织切片中与淀粉样蛋白结合后荧光强度增强。

 

　　MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报，我们不为任何个人用途提供产品和服务

 

　　生物活性

 

　　体外研究

 

　　硫黄素 T (ThT) 是一种苯并噻唑染料，在与淀粉样蛋白原纤维结合后表现出增强的荧光，通常用于离体和体外诊断淀粉样蛋白原纤维。在水溶液中，发现硫黄素 T 以胶束形式存在，其浓度通常用于通过荧光测定法监测原纤维 (——10 -20 μM)。在硫黄素 T 的不同浓度下测量比电导率变化，临界胶束浓度计算为 4.0±0.5 μM。硫黄素 T 的荧光激发和发射的变化也取决于胶束的形成。使用原子力显微镜直接观察直径为 3 nm 的硫黄素 T 胶束，并沿着纤维长度观察具有代表性的原纤维的结合硫黄素 T 胶束。硫黄素 T 的浓度增加到临界胶束浓度以上表明沿着淀粉样原纤维长度结合的胶束数量增加。硫黄素 T 胶束在低 pH 值下被破坏，如通过原子力显微镜观察到的，硫黄素 T 与淀粉样蛋白原纤维结合后的荧光增强在 pH 值降至 3 以下时也减少了几倍。硫黄素 T 的胶束结合淀粉样蛋白原纤维导致增强荧光发射[1]。

 

　　实验参考方法

 

　　激酶测定[1]

 

　　Thioflavin T (ThT) 通过将约3 mg的干粉溶解在1 mL水中制备。该溶液经过0.22 μm的注射器过滤器过滤，然后通过将母液稀释于乙醇中并使用在416 nm处的消光系数为26,620 M^-1 cm^-1来测量浓度。母液储存于4 °C，盖上铝箔，可以使用长达一个月，以通过稀释在水或所需缓冲液中制备测定溶液[1]。

 

　　对Thioflavin T (ThT)荧光发射的测量是在450 nm激发下进行的，记录465到565 nm之间的光谱，使用5 nm的狭缝，通过FluoroMax 2荧光光谱仪。激发光谱是通过将发射波长设置为482 nm，并在300到470 nm之间收集光谱，狭缝宽度为5 nm，积分时间为1秒，间隔为1 nm。激发在450 nm下，465到565 nm之间的发射光谱被收集。在存在淀粉样纤维的情况下，使用不同浓度的Thioflavin T和5 ng/mL淀粉样蛋白（根据初始蛋白浓度计算）进行测量，然后收集光谱[1]。

 

　　MCE尚未独立确认这些方法的准确性。这些仅供参考。

 

　　参考文献

 

　　[1]. Khurana R, et al. Mechanism of thioflavin T binding to amyloid fibrils. J Struct Biol. 2005 Sep;151(3):229-38.