DCFH-DA
2019-03-14 
MCE小分子
DCFH-DA是可渗透细胞，用于检测细胞内活性氧 (ROS) 的探针。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
生物活性
DCFH-DA体外研究
通过流式细胞术分析DCFH-DA探针氧化表明，difESCs中ROS的基础水平比胚胎干细胞（ESC）大约6-7倍。 DCFH-DA和DCFDA探针都以其初始形式是非荧光的，但它们在细胞内经历多步转化，导致荧光产物二氯荧光素（DCF）的形成。 这两种探针之间的唯一区别是DCFH-DA的转化涉及氧化。 因此，与DCFDA探针相关的荧光相反，H2DCFDA处理的细胞的荧光取决于细胞内ROS水平。 令人惊讶的是，流式细胞术分析显示，ESC和负载H2DCFDA的difESC的荧光水平之间的差异接近来自DCFDA处理的细胞的信号之间的差异。 后者表明ESCs中氧化H2DCFDA荧光信号低的ROS依赖性原因
实验参考方法
DCFH-DA激酶测定
ROS测量
为了检测细胞内ROS水平，使用ROS敏感性探针H2DCFDA。 将贴壁细胞（ESC，difESC，eMSC，HeLa，U118）与PBS中的5μM染色溶液在37℃下在黑暗中孵育30分钟，然后用0.05％胰蛋白酶-EDTA溶液收获，悬浮在新鲜培养基中，并且 用流式细胞仪立即分析。 将对照和PHA活化的淋巴细胞重悬浮于PBS中，与5μMH2DCFDA在黑暗中于37℃温育30分钟，并立即分析。 如果需要，与H2DCFDA探针一起使用荧光染料DCFDA的ROS不敏感修饰。 染色程序与H2DCFDA [1]相同。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考
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生物活性
DCFH-DA体外研究
通过流式细胞术分析DCFH-DA探针氧化表明，difESCs中ROS的基础水平比胚胎干细胞（ESC）大约6-7倍。 DCFH-DA和DCFDA探针都以其初始形式是非荧光的，但它们在细胞内经历多步转化，导致荧光产物二氯荧光素（DCF）的形成。 这两种探针之间的唯一区别是DCFH-DA的转化涉及氧化。 因此，与DCFDA探针相关的荧光相反，H2DCFDA处理的细胞的荧光取决于细胞内ROS水平。 令人惊讶的是，流式细胞术分析显示，ESC和负载H2DCFDA的difESC的荧光水平之间的差异接近来自DCFDA处理的细胞的信号之间的差异。 后者表明ESCs中氧化H2DCFDA荧光信号低的ROS依赖性原因
实验参考方法
DCFH-DA激酶测定
ROS测量
为了检测细胞内ROS水平，使用ROS敏感性探针H2DCFDA。 将贴壁细胞（ESC，difESC，eMSC，HeLa，U118）与PBS中的5μM染色溶液在37℃下在黑暗中孵育30分钟，然后用0.05％胰蛋白酶-EDTA溶液收获，悬浮在新鲜培养基中，并且 用流式细胞仪立即分析。 将对照和PHA活化的淋巴细胞重悬浮于PBS中，与5μMH2DCFDA在黑暗中于37℃温育30分钟，并立即分析。 如果需要，与H2DCFDA探针一起使用荧光染料DCFDA的ROS不敏感修饰。 染色程序与H2DCFDA [1]相同。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考
