Filipin III菲律宾菌素 III是Fungal抑制剂

　　Filipin III是Filipin的主要成分，Filipin是一种28-元环五烯大环内酯类抗真菌抗生素，由S.filipinensis，S.avermitilis和S.miharaensis产生。Filipin可以与膜甾醇相互作用导致膜结构的改变。

 

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　　Filipin III菲律宾菌素III的生物活性

 

　　体外研究

 

　　细胞染色：

 

　　用TBS-T配制Filipin III工作液。在黑暗中，用50μg/mL Filipin III处理NCI-60癌细胞。室温下孵育1小时后，用TBS-T洗涤细胞。然后将盖玻片分离并封固在水基封固剂中。在配备40X油物镜的Olympus Provis荧光显微镜拍摄图像，使用MetaXpress图像分析软件（Molecular Devices Corp.，Sunnyvale CA）中的粒度算法完成胆固醇水平的量化。

 

　　Huang Y,et al评估了迁移体上相对于TSPAN-GFP的胆固醇富集。用2μg/mL Filipin III在37°C下孵育稳定表达TSPAN4-GFP的NRK细胞。处理15分钟后，用共聚焦显微镜获取Z堆栈图像，测量migrasomes filipin III强度(IpM)、migrasomes上的TSPAN4-GFP强度(ItM)、RFs上的filipin III强度(IpR)和TSPAN4-RF上的GFP强度(ItR)。

 

　　或如Kwiatkowska K,et al将成纤维细胞(Fibroblast)暴露于25μg/ml Filipin III，在黑暗中孵育45分钟(20℃)，获得染色结果。产品推荐：Cycloheximide放线菌酮CHX的作用

 

　　组织染色：

 

　　Filipin以高亲和力与胆固醇结合；然而，它表现出快速的光漂白，并且在紫外线激发下仅产生适度的自然荧光，这使得在共焦显微镜下检测它变得困难。

 

　　Reid PC et al利用Filipin III检测神经元中的胆固醇积累。在室温下避光条件下，用Filipin III(125μg/ml)染色NPC小脑组织2小时。一起孵育后，用不含FBS的0.5 M Tris洗涤载玻片和荧光染料复染。在第22天，可观察到Purkinje神经元细胞中胆固醇积累。或用Filipin III染色NPC皮质，在第22天，可观察到大多数神经元的轴突小丘区域有胆固醇积累。

 

　　Novak A et al利用Filipin III检测肿瘤中的胆固醇积累。将Filipin III溶解在二甲亚砜/PBS(1:4)，配制成50μg/mL的工作液。随后与组织切片在室温下孵育30 min。冲洗后，将载玻片封固于水性荧光封固剂，用于随后观察。产品推荐：Rapamycin-雷帕霉素-西罗莫司-mTOR抑制剂

 

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