拮抗剂Ambrisentan安倍生坦

　　Ambrisentan是一种选择性的ET A型受体(ETAR)拮抗剂。

 

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　　拮抗剂Ambrisentan安倍生坦的生物活性

 

　　体外研究

 

　　Ambrisentan是一种内皮素A型受体拮抗剂。Ambrisentan能诱导Nrf2的激活。在缺氧暴露24小时后，BMEC单层细胞的内皮通透性增加，与载体控制相比，Ambrisentan减轻了缺氧诱导的BMEC泄漏。当对治疗前的BMEC进行针对Nrf2的siRNA转染时，这些结果将会逆转。

 

　　体内研究

 

　　在Ambrisentan组中，肝脏羟脯氨酸含量明显低于控制组（分别为18.0μg/g±6.1μg/g vs 33.9μg/g±13.5μg/g肝脏，P=0.014）。通过Sirius红染色和α-平滑肌肌动蛋白阳性区域估计的肝纤维化，以及指示活化肝星状细胞的区域，在Ambrisentan组中也明显较低（分别为0.46%±0.18%vs 1.11%±0.28%，P=0.0003；以及0.12%±0.08%vs 0.25%±0.11%，P=0.047）。此外，Ambrisentan组的肝脏RNA表达水平，procollagen-1和组织金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）分别降低60%和45%。肝脏的炎症、脂肪变性和内皮素相关mRNA表达在两组间没有显著差异。Ambrisentan通过抑制肝星状细胞的激活和降低procollagen-1和TIMP-1基因的表达，减缓了肝纤维化的进程。Ambrisentan并未影响炎症或脂肪变性。

 

　　MCE并未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。

 

　　实验参考方法

 

　　细胞分析

 

　　除非另有说明，每个BMEC实验的细胞会随机被分为4组：(1)正常氧条件下的对照组（Nx-CTRL）；(2)正常氧条件下处理过的组；(3)低氧（24小时）的对照组（Hx-CTRL）；以及(4)低氧（24小时）处理过的组。如先前描述，Nrf2激活剂会在任何低氧接触之前的24小时添加。细胞处理包括：Protandim（100μg/mL）、methazolamide（125μg/mL）、nifedipine（7μg/mL）或Ambrisentan（40μg/mL）。此外，一些细胞会用Nrf2 siRNA进行处理。在这些实验中，siRNA会在药物处理前的24小时添加。对BMEC进行24小时低氧暴露的理由是确保细胞在药物预处理（正常氧条件下的24小时）和24小时低氧暴露期间保持转染siRNA。数据至少来自三次单独的细胞培养制备，在三个不同的日子上收集（n=9）。产品推荐：Bosentan波生坦

 

　　动物给药

 

　　老鼠

 

　　共使用了13只雄性FLS-ob/ob小鼠（年龄，8周；体重，42.88 g±1.74 g）。在12周大的时候，雄性FLS-ob/ob小鼠随机分配到Ambrisentan（n=8）或对照组（n=5）。胃灌流法是在有意识的动物上使用适当大小的胃管进行。每天下午，通过胃管一次性给予Ambrisentan(2.5 mg/kg)口服治疗4周。对照组则给予水。在第4周，让动物禁食4小时，然后抽取尾静脉血液并进行血糖测定。通过在4周后注射pentobarbital麻醉药杀死动物，并从右心室采集血样。将血浆样本冷冻并存储在-80°C。然后称量肝脏和内脏脂肪，用液氮迅速冷冻并存储在-80°C。额外的肝脏样本固定在10%的缓冲福尔马林中，并嵌入石蜡以进行组织学分析。

 

　　MCE没有独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。