RS 504393是CCE2嵇康集
2019-12-04 
MCE小分子
RS 504393 是一种选择性的 CCR2 拮抗剂，作用于人重组 CCR2 和 CCR1 受体，IC50 值分别为 89 nM 和 > 100 μM。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
RS 504393的生物活性
体外
RS 504393 以330 nM 的IC 50抑制MCP-1诱导的趋化性。RS 504393处理可显着抑制变应原诱导的β-己糖胺酶释放。没有过敏原引发，MCP-1诱导肥大细胞脱粒，被RS 504393完全抑制。
体内
具有CCL2的RS504393（0.3-3μg）剂量依赖性地逐步抑制小鼠的热痛觉过敏[1]。RS 504393（5 mg / kg，iv）抑制了由LPS诱导的BALF中白细胞数量的增加和总蛋白质含量的增加。RS504393显着下调LPS诱导的IL-1β，PAI-1 mRNA和蛋白质表达的升高。RS504393显着抑制LPS诱导的肺水肿，富含蛋白质的液体，多形核积累和支气管壁增厚。RS-504393可显着降低肾脏病理，特别是在UUO模型中由I型胶原合成减少介导的广泛的间质纤维化。
溶剂与溶解度
体内：
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案，配制前请先配制澄清的储备液，再依次添加助溶剂 (为保证实验结果的可靠性，体内实验的工作也建议您现用现配，当天使用；澄清的储备液可以根据储存条件，适当保存；以下溶剂前的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比)：
1.请依序添加每种溶剂： 10% DMSO 》40％PEG300 》5％吐温80 》生理盐水45％
溶解度：≥1.25 mg / mL（2.99 mM）; 清晰的解决方案
2.请依序添加每种溶剂： 10% DMSO 》90％玉米油
溶解度：≥1.25 mg / mL（2.99 mM）; 清晰的解决方案
*以上所有助溶剂都可在 MCE 网站选购。
实验参考方法
激酶测定
通过在含有10 ng / mL鼠重组IL-3、10 ng / mL重组SCF和5％鼠血清的RPMI1640中与抗DNP IgE孵育，使分离的肥大细胞致敏。然后用含有10 ng / mL鼠重组IL-3、10 ng / mL重组SCF，0.04％BSA和10 mM HEPES的HBSS洗涤细胞。重悬细胞的浓度为2至8×10 4 将细胞/ 100μL转移到96孔U型底板的一式三份孔中，并在添加DNP-白蛋白或化合物48/80之前在37°C平衡10分钟。45分钟后，将板在4℃以290g离心5分钟。使用Published协议确定培养上清液的β-己糖胺酶活性。将上清液的50μL等分试样与100μL2.5 mM对硝基苯基-N-乙酰基β-d氨基葡萄糖苷溶解在另一个0.096 mol /柠檬酸缓冲液中（用磷酸二钠调节至pH 4.5）一起放入另一个96孔板的孔中。在37°C下孵育90分钟后，通过添加50μL用氢氧化钠调节至pH 10.7的0.4mol / L甘氨酸终止反应。用570 nm的参考滤光片在405 nm下测量有色产品。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。
动物管理局
将6至8周大，体重20±2 g的雄性C57BL / 6J小鼠（n = 30）和雄性纯合CCR1，CCR2和CCR3敲除小鼠（每种表型n = 12）用氯胺酮（ 80毫克/千克）和赛拉嗪（30毫克/千克）腹膜内给药。PBS或LPS（5 mg / kg）的鼻内给药量为1 mL / kg体重。在LPS攻击前30分钟，用溶媒或RS504393（5 mg / kg）腹膜内处理C57BL / 6J小鼠。LPS攻击后四个小时，通过腹膜内注射过量戊巴比妥终止小鼠。使小鼠保持12小时的光/暗循环，随意进食小鼠食物和水。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。
