RU486是PR和GR拮抗剂
2019-04-28 
MCE小分子
RU486是黄体酮受体 (PR) 和糖皮质激素受体 (GR) 拮抗剂，体外实验中的 IC50 值分别为0.2 nM 和2.6 nM
RU486分子量：429.59
RU486的生物活性
体外
第一种竞争性黄体酮拮抗剂米非司酮的发现刺激了对更有效和更具选择性的抗孕激素的强烈追求。 在10μM暴露于米非司酮4天后评估细胞生长，浓度接近人类可达到的血浆浓度。 当与米非司酮联合给予HeLa细胞时，顺铂的抗增殖作用增强。 在HeLa细胞中，顺铂与米非司酮组合的IC50比单独顺铂（34.2μM）低（14.2μM），差异大约为2.5倍。 用米非司酮治疗后，细胞内顺铂在HeLa细胞中的积累量增加了2倍，显着差异（p = 0.009），与单独的顺铂相比，从0.79到1.52μg/ mg蛋白质。
体内
宫颈肿瘤异种移植模型仅用顺铂治疗，与对照组相比存在肿瘤生长抑制。 然而，在所用剂量下，顺铂和米非司酮联合使用时肿瘤体重减轻更为显着（p <0.05），与研究结束时单独治疗相比，减少了约50％。 对成年雄性Sprague-Dawley大鼠进行4天狂欢样EtOH给药方案（每8小时3至5g / kg / i.g，设计产生<300mg / dL的峰值血液EtOH水平（BELs））。 动物亚组接受皮下注射。 注射米非司酮（20或40 mg / kg花生油）。 尽管米非司酮对未经过EtOH治疗的动物的行为没有显着改变，但米非司酮（40 mg / kg）的预处理显着降低了EtOH戒断的严重程度。 饮食和药物之间的显着相互作用，F（5,55）= 3.92，p <0.05，使得接受载体的EtOH处理的动物或20mg / kg米非司酮显示出比接受该物质的EtOH-幼稚动物显着更多的EtOH戒断迹象。 药物治疗。 重要的是，用40 mg / kg米非司酮治疗可以剂量依赖的方式显着降低EtOH戒断的严重程度
RU486的实验参考方法
RU486的激酶测定
将T47D人乳腺癌细胞以每孔10,000个细胞接种于96孔组织培养板中的测定培养基[不含酚红的RPMI培养基含有5％（v / v）活性炭处理的FBS和1％（v / v）青霉素 - 链霉素。 两天后，倾析培养基并在新鲜测定培养基中以0.1％（v / v）二甲基亚砜的终浓度加入米非司酮或对照。 二十四小时后，使用SEAP试剂盒进行碱性磷酸酶测定。 简而言之，倾析培养基并将细胞在室温下用5％（v?? / v）福尔马林固定30分钟。 在室温下用Hanks缓冲盐水溶液洗涤细胞一次。 然后加入等体积（0.05mL）的1x稀释缓冲液，测定缓冲液和1:20底物/增强剂混合物。 在室温下在黑暗中孵育1小时后，将裂解物转移至白色96孔板中，并使用LuminoSkan Ascent 读取发光。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
RU486的细胞分析
使用HeLa和CaSki人宫颈癌细胞系。 使用XTT测定评估米非司酮对暴露于顺铂的细胞增殖的影响。 该测定基于黄色四唑盐XTT的裂解，通过代谢活性细胞形成橙色甲dye染料。 程序如下。 将细胞接种到96孔板中; 在100μL培养基中，每孔密度为6×103个活细胞。 在单独使用顺铂或顺铂加米非司酮联合治疗结束时，向每个孔中加入50μLXTT（终浓度0.3 mg / mL），然后在含有5％CO2的37°加湿气氛中孵育4小时。 C。 使用微量滴定板ELISA读数器在492nm处通过分光光度法测量样品的吸光度。
动物实验研究
小鼠
在6-8周龄的雌性裸鼠皮下植入6×106个HeLa细胞的侧腹。 一旦肿瘤为~5×5mm，将动物配对进入治疗组和对照组。 每组由8只荷瘤小鼠组成。 腹膜内给药药物或载体在第0天开始。顺铂作为单一药剂，在第1天至第3天每天以3mg / kg的剂量腹膜内给药; 作为单一药剂的米非司酮的剂量为2mg / kg /天，皮下注射3天; 在组合研究中，小鼠以相同的时间表同时接受顺铂，并且在顺铂给药前3天以相同的剂量接受米非司酮。 对照动物仅接受载体。 给药后，称重小鼠，每周两次用卡尺测量肿瘤。 计算肿瘤重量。 实验进行了74天，之后将所有动物称重并人道地安乐死。
大鼠
使用成年雄性Sprague-Dawley大鼠，其在到达时重224至245g。 在0800施用EtOH或对照饮食后，每天一次皮下（s.c.）施用米非司酮（20或40mg / kg）或媒介物（花生油）。 将米非司酮悬浮在花生油中并在注射前至少24小时超声处理30分钟，然后将其储存在4℃直至需要。 在给药之前和根据需要将悬浮液涡旋10至15分钟。
RU486分子量：429.59
RU486的生物活性
体外
第一种竞争性黄体酮拮抗剂米非司酮的发现刺激了对更有效和更具选择性的抗孕激素的强烈追求。 在10μM暴露于米非司酮4天后评估细胞生长，浓度接近人类可达到的血浆浓度。 当与米非司酮联合给予HeLa细胞时，顺铂的抗增殖作用增强。 在HeLa细胞中，顺铂与米非司酮组合的IC50比单独顺铂（34.2μM）低（14.2μM），差异大约为2.5倍。 用米非司酮治疗后，细胞内顺铂在HeLa细胞中的积累量增加了2倍，显着差异（p = 0.009），与单独的顺铂相比，从0.79到1.52μg/ mg蛋白质。
体内
宫颈肿瘤异种移植模型仅用顺铂治疗，与对照组相比存在肿瘤生长抑制。 然而，在所用剂量下，顺铂和米非司酮联合使用时肿瘤体重减轻更为显着（p <0.05），与研究结束时单独治疗相比，减少了约50％。 对成年雄性Sprague-Dawley大鼠进行4天狂欢样EtOH给药方案（每8小时3至5g / kg / i.g，设计产生<300mg / dL的峰值血液EtOH水平（BELs））。 动物亚组接受皮下注射。 注射米非司酮（20或40 mg / kg花生油）。 尽管米非司酮对未经过EtOH治疗的动物的行为没有显着改变，但米非司酮（40 mg / kg）的预处理显着降低了EtOH戒断的严重程度。 饮食和药物之间的显着相互作用，F（5,55）= 3.92，p <0.05，使得接受载体的EtOH处理的动物或20mg / kg米非司酮显示出比接受该物质的EtOH-幼稚动物显着更多的EtOH戒断迹象。 药物治疗。 重要的是，用40 mg / kg米非司酮治疗可以剂量依赖的方式显着降低EtOH戒断的严重程度
RU486的实验参考方法
RU486的激酶测定
将T47D人乳腺癌细胞以每孔10,000个细胞接种于96孔组织培养板中的测定培养基[不含酚红的RPMI培养基含有5％（v / v）活性炭处理的FBS和1％（v / v）青霉素 - 链霉素。 两天后，倾析培养基并在新鲜测定培养基中以0.1％（v / v）二甲基亚砜的终浓度加入米非司酮或对照。 二十四小时后，使用SEAP试剂盒进行碱性磷酸酶测定。 简而言之，倾析培养基并将细胞在室温下用5％（v?? / v）福尔马林固定30分钟。 在室温下用Hanks缓冲盐水溶液洗涤细胞一次。 然后加入等体积（0.05mL）的1x稀释缓冲液，测定缓冲液和1:20底物/增强剂混合物。 在室温下在黑暗中孵育1小时后，将裂解物转移至白色96孔板中，并使用LuminoSkan Ascent 读取发光。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
RU486的细胞分析
使用HeLa和CaSki人宫颈癌细胞系。 使用XTT测定评估米非司酮对暴露于顺铂的细胞增殖的影响。 该测定基于黄色四唑盐XTT的裂解，通过代谢活性细胞形成橙色甲dye染料。 程序如下。 将细胞接种到96孔板中; 在100μL培养基中，每孔密度为6×103个活细胞。 在单独使用顺铂或顺铂加米非司酮联合治疗结束时，向每个孔中加入50μLXTT（终浓度0.3 mg / mL），然后在含有5％CO2的37°加湿气氛中孵育4小时。 C。 使用微量滴定板ELISA读数器在492nm处通过分光光度法测量样品的吸光度。
动物实验研究
小鼠
在6-8周龄的雌性裸鼠皮下植入6×106个HeLa细胞的侧腹。 一旦肿瘤为~5×5mm，将动物配对进入治疗组和对照组。 每组由8只荷瘤小鼠组成。 腹膜内给药药物或载体在第0天开始。顺铂作为单一药剂，在第1天至第3天每天以3mg / kg的剂量腹膜内给药; 作为单一药剂的米非司酮的剂量为2mg / kg /天，皮下注射3天; 在组合研究中，小鼠以相同的时间表同时接受顺铂，并且在顺铂给药前3天以相同的剂量接受米非司酮。 对照动物仅接受载体。 给药后，称重小鼠，每周两次用卡尺测量肿瘤。 计算肿瘤重量。 实验进行了74天，之后将所有动物称重并人道地安乐死。
大鼠
使用成年雄性Sprague-Dawley大鼠，其在到达时重224至245g。 在0800施用EtOH或对照饮食后，每天一次皮下（s.c.）施用米非司酮（20或40mg / kg）或媒介物（花生油）。 将米非司酮悬浮在花生油中并在注射前至少24小时超声处理30分钟，然后将其储存在4℃直至需要。 在给药之前和根据需要将悬浮液涡旋10至15分钟。
