Stemregenin 1(SR1)拮抗剂

　　Stemregenin 1 是一种有效的芳香烃受体 (AhR) 拮抗剂，IC50 为 127 nM。

 

　　MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报，我们不为任何个人用途提供产品和服务

 

　　我们将采用定制合成服务的方式为您快速提供所需产品和技术服务

 

　　溶解性数据

 

　　动物实验：

 

　　请根据您的 实验动物和给药方式 选择适当的溶解方案。

 

　　以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液，再依次添加助溶剂：

 

　　——为保证实验结果的可靠性，澄清的储备液可以根据储存条件，适当保存；体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用；

 

　　以下溶剂前显示的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过加热和/或超声的方式助溶

 

　　方案 一

 

　　请依序添加每种溶剂： 10% DMSO  →  40% PEG300  →  5% Tween-80  →  45% Saline

 

　　Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (5.82 mM); 澄清溶液

 

　　此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液。

 

　　以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；再向上述体系中加入 50 μL Tween-80，混合均匀；然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL。

 

　　生理盐水的配制：将 0.9 g 氯化钠，溶解于 ddH₂O 并定容至 100 mL，可以得到澄清透明的生理盐水溶液。

 

　　方案 二

 

　　请依序添加每种溶剂： 10% DMSO  →  90% (20% SBE-β-CD in Saline)

 

　　Solubility: 2.5 mg/mL (5.82 mM); 悬浊液; 超声助溶

 

　　此方案可获得 2.5 mg/mL的均匀悬浊液，悬浊液可用于口服和腹腔注射。

 

　　以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中，混合均匀。

 

　　2 g SBE-β-CD（磺丁基醚 β-环糊精）粉末定容于 10 mL 的生理盐水中，完全溶解至澄清透明。

 

　　方案 三

 

　　请依序添加每种溶剂： 10% DMSO  →  90% Corn Oil

 

　　Solubility: ≥ 2.5 mg/mL (5.82 mM); 澄清溶液

 

　　此方案可获得 ≥ 2.5 mg/mL（饱和度未知）的澄清溶液，此方案实验周期在半个月以上的动物实验酌情使用。

 

　　以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中，混合均匀。

 

　　生物活性

 

　　体外研究

 

　　Stemregenin 1 通过拮抗芳烃受体 (AhR) 发挥作用。Stemregenin 1 在 5 至 7 天后增加 CD34+ 细胞的数量，EC50 值约为 120 nM。Stemregenin 1 抑制光亲和配体 (PAL) 结合 (IC50=40 nM) 这些结果支持以下结论：Stemregenin 1 诱导的 CD34+ 细胞扩增是通过直接结合和抑制 AhR 介导的[1]。芳烃受体拮抗剂 Stemregenin 1 可强力促进人类 CD34+ 细胞的体外扩增。 Stemregenin 1 处理可加速 CD34+ 细胞的增殖并降低 VentX[2] 的表达水平[2]。

 

　　实验参考方法

 

　　细胞实验[1]

 

　　将250,000个脐带血（CB）来源的CD34+细胞在对照条件（0.01% DMSO）或含StemRegenin 1（0.75 μM）的培养体系中培养3周。在此期间，对照组细胞扩增了1080倍，而StemRegenin 1处理组细胞扩增达2024倍（相对于起始细胞数量）。随后，将未培养的CD34+脐带血细胞（30至30,000个）或相当于30至10,000个起始细胞数量的培养后细胞进行移植。细胞通过眶后静脉注射途径静脉输注至亚致死剂量照射（300 rads，部分实验为200 rads）的6至10周龄NSG小鼠体内。移植在照射后24小时内完成。通过采集小鼠眶后窦血液或骨髓样本，利用抗人CD45和抗小鼠CD45抗体进行流式细胞术分析，监测移植后的嵌合情况。移植后13至16周处死小鼠，收集双侧股骨和胫骨的骨髓、脾脏及胸腺用于进一步分析。对于二次移植实验，将每只受体小鼠50%的骨髓细胞移植至另一只经亚致死照射的NSG小鼠中。二次移植后15周，取其骨髓样本进行流式细胞术分析，评估造血干细胞的长期重建能力。

 

　　MCE未独立验证上述方法的准确性，仅供参考。

 

　　参考文献

 

　　[1]. Boitano AE, et al. Aryl Hydrocarbon Receptor Antagonists Promote the Expansion of Human Hematopoietic Stem Cells. Science. 2010 Sep 10;329(5997):1345-8.

 

　　[2]. Gao H, et al. Suppression of homeobox transcription factor VentX promotes expansion of human hematopoietic stem/multipotent progenitor cells. J Biol Chem. 2012 Aug 24;287(35):29979-87.