Fluo-3AM工作浓度-染色
2024-12-25 
MCE
Fluo-3 AM 是 Ca2+ 的荧光螯合剂，对钙有很高的亲和性。Fluo-3 AM 可对细胞内钙离子进行特异性识别，具有高灵敏性，对细胞毒性较低，增加 AM乙酰甲酯可以好的进入到细胞内，在被细胞内的酯酶剪切后滞留在细胞内与钙离子结合，产生较强荧光。
MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报，我们不为任何个人用途提供产品和服务
Fluo-3AM钙Ca2+指示剂的生物活性
体外研究
1. Fluo-3 AM 工作液的配制
1.1 制备储存液
用无水 DMSO 稀释 Fluo-3 AM 去配制 10 mM 的储备液。
注：Fluo-3 AM 储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存。
1.2 工作液的配制
用预热好的 HBSS 稀释储存液，配制成 1-10 μM 的 Fluo-3 AM 工作液。
注：请根据实际情况调整 Fluo-3 AM 工作液浓度，且现用现配。
2. 细胞染色 (悬浮细胞)
2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在1×106/mL
2.2 加入 1 mL Fluo-3 AM 工作液，室温孵育 5-30 分钟。
2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。
2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
2.5 用 1 mL HBSS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
3. 细胞染色 (贴壁细胞)
3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。
3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育 5-30 分钟。
3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟，使用荧光显微镜进行观察。
* 请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限：-80°C, 6 months; -20°C, 1 month (protect from light)。-80°C储存时，请在6个月内使用，-20°C储存时，请在1个月内使用。
