DNA荧光染剂Hoechst 33342

　　Hoechst 33342 是 Hoechst 系列的标记染料。Hoechst 系列是活细胞核标记染料。Hoechst 通过结合 DNA 双链中的小沟而结合核酸。Hoechst 倾向于结合富含 A/T 的 DNA 链。同时，富含 A/T 的双链 DNA 使荧光强度显著增强。Hoechst 可穿过细胞膜，结合活细胞或固定细胞。Hoechst 染料的荧光强度随着溶液 pH 升高而增强。

 

　　MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报，我们不为任何个人用途提供产品和服务

 

　　DNA荧光染剂Hoechst 33342生物活性

 

　　体外研究

 

　　Hoechst 工作液的配制

 

　　1.1 制备储存液

 

　　用 DMSO 配制 1 mg/mL 的 Hoechst 储存液。

 

　　注：Hoechst 储存液建议分装后于 -4℃ 或 -20℃ 避光保存。

 

　　1.2 工作液的配制

 

　　用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，终浓度为 10 μg/mL Hoechst 工作液。

 

　　注：请根据实际情况调整 Hoechst 工作液浓度，且现用现配。

 

　　2. 细胞染色（悬浮细胞）

 

　　2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在 1×106/mL

 

　　2.2 加入 1 mL Hoechst 工作液，室温孵育 3-10 分钟。

 

　　2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。

 

　　2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。

 

　　2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。

 

　　3. 细胞染色（贴壁细胞）

 

　　3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

 

　　3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。

 

　　3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育 3-10 分钟。

 

　　3.4 吸去染料工作液，用培养基洗 2-3 次，每次 5 分钟，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。

 

　　注意事项

 

　　1. 请根据实际情况调整 Hoechst 工作液浓度。

 

　　2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。相关产品推荐：Chloroquine

 

　　3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

　　实验参考方法

 

　　细胞蛋白检测

 

　　使用Hoechst 33342标记细胞核DNA 步骤1：将Hoechst储备溶液稀释1:100，用于标记。 步骤2：吸去培养皿中的细胞培养基。用PBS+洗涤细胞三次。 步骤3：将细胞在室温下的Hoechst标记溶液中孵育10-30分钟。 步骤4：吸去标记溶液。用PBS+洗涤细胞三次。 步骤5：安装载玻片。 步骤6：对细胞进行成像（Hoechst 33342的激发波长约为353 nm，发射波长约为483 nm）。

 

　　MCE并未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。