FITC-Dextran荧光染料

　　FITC-Dextran (MW 40000) 是一种异硫氰酸荧光素 (FITC) 葡聚糖荧光探针 (Ex=495 nm; Em=525 nm)。FITC-Dextran (MW 400000) 可作为一种标记物来揭示热休克引起的细胞损伤，并研究细胞凋亡的早期和晚期阶段。FITC-Dextran (MW 400000) 还可用于细胞渗透性的研究，如血脑屏障通透性以及血脑屏障破坏程度的测定。

 

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　　FITC-Dextran荧光染料的生物活性

 

　　体外研究

 

　　指南（以下是我们推荐的协议。这个协议只是提供一个指导方针，应根据您的具体需求进行修改）

 

　　细胞标记:

 

　　适用于正在发生凋亡的 HeLa 细胞和人外周血单个核细胞 (PBMC) (活的 HeLa 和 PBMC 不被 FITC-Dextran 染色)。

 

　　1. 43.5°C 孵育 1 h，37°C 孵育 8 h，诱导细胞凋亡。

 

　　2. 将细胞悬浮在 100 μL 的培养基中，在 Q-prep 管与 10 μL 的 propidium iodide (PI)，10 μL 的 FITC-Dextran (MW 40000) 混合，PI 和 FITC-Dextran (MW 40000) 的最终浓度分别为 7.5 μM 和 1.13 μM。

 

　　3. 将细胞在室温黑暗条件下培养 25 分钟。

 

　　4. 取 3 mL 培养基的标记细胞，500 g 离心 10 分钟。

 

　　5. 取离心细胞，加入 1 mL 培养基，用流式细胞术或荧光显微镜分析 (PI: Ex=500 nm, Em=600 nm; FITC-Dextran (MW 40000): Ex=495 nm, Em=525 nm)。

 

　　细胞旁渗透性检测

 

　　1. 在 transwell 室的基础培养基中加入 FITC-Dextran (0.1 mg/mL)。

 

　　2. 在 15 分钟后从 transwell 插入器中收集培养基。

 

　　3. 测量荧光信号 (Ex=485 nm, Em=538 nm)。

 

　　4. 根据荧光强度计算 FITC-Dextran 浓度。

 

　　5. 计算渗透率。

 

　　体内研究

 

　　指南（以下是我们推荐的方案。此方案仅提供一个指导，应根据您的具体需求进行修改）。

 

　　肠屏障功能测定

 

　　1. 小鼠饥饿处理 4 小时。

 

　　2. FITC-Dextran MW 40000 灌胃小鼠 (0.6 mg/g)。

 

　　3. 在 4 h 内测量荧光强度 (Ex nm/Em 520 nm)。