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IPTG诱导蛋白表达的原理

  异丙基-β-D-硫代半乳糖苷IPTG 是异乳糖模拟物,能够引起乳糖操纵子的转录过程,因此能够诱导乳糖操纵子下游基因对应蛋白的表达。
 
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  生物活性
 
  体外研究
 
  大肠杆菌对 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷IPTG 的摄取可以独立于乳糖通透酶的作用,因为还涉及其他运输途径。在低浓度下,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷IPTG 通过乳糖通透酶进入细胞,但在高浓度 (通常用于蛋白质诱导) 下,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷IPTG 可以独立于乳糖通透酶进入细胞[1]。
 
  IPTG中文名称:异丙基-β-D-硫代半乳糖苷
 
  溶解性数据:
 
  动物实验:
 
  请根据您的 实验动物和给药方式 选择适当的溶解方案。
 
  以下溶解方案都请先按照 In Vitro 方式配制澄清的储备液,再依次添加助溶剂:
 
  ——为保证实验结果的可靠性,澄清的储备液可以根据储存条件,适当保存;体内实验的工作液,建议您现用现配,当天使用;
 
  以下溶剂前显示的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比;如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶
 
  方案 一
 
  请依序添加每种溶剂: 10% DMSO  →  40% PEG300  →  5% Tween-80  →  45% Saline
 
  Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (8.73 mM); 澄清溶液
 
  此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL(饱和度未知)的澄清溶液。
 
  以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀;再向上述体系中加入 50 μL Tween-80,混合均匀;然后再继续加入 450 μL 生理盐水 定容至 1 mL。
 
  生理盐水的配制:将 0.9 g 氯化钠,溶解于 ddH₂O 并定容至 100 mL,可以得到澄清透明的生理盐水溶液。
 
  方案 二
 
  请依序添加每种溶剂: 10% DMSO  →  90% (20% SBE-β-CD in Saline)
 
  Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (8.73 mM); 澄清溶液
 
  此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL(饱和度未知)的澄清溶液。
 
  以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液 中,混合均匀。
 
  2 g SBE-β-CD(磺丁基醚 β-环糊精)粉末定容于 10 mL 的生理盐水中,完全溶解至澄清透明。
 
  方案 三
 
  请依序添加每种溶剂: 10% DMSO  →  90% Corn Oil
 
  Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (8.73 mM); 澄清溶液
 
  此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL(饱和度未知)的澄清溶液,此方案实验周期在半个月以上的动物实验酌情使用。
 
  以 1 mL 工作液为例,取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中,混合均匀。
 
  以下溶解方案,请直接配制工作液。建议现用现配,在短期内尽快用完。 以下溶剂前显示的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比; 如在配制过程中出现沉淀、析出现象,可以通过加热和/或超声的方式助溶。
 
  方案 一
 
  请依序添加每种溶剂: PBS
 
  Solubility: 100 mg/mL (419.64 mM); 澄清溶液; 超声助溶
 
  参考文献
 
  [1]. Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside

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