FITC-Dextran (MW 40000)荧光探针

　　FITC-Dextran(MW 40000)是一种异硫氰酸荧光素(FITC)葡聚糖荧光探针(Ex=495 nm;Em=525 nm)。FITC-Dextran(MW 400000)可作为一种标记物来揭示热休克引起的细胞损伤，并研究细胞凋亡的早期和晚期阶段。FITC-Dextran(MW 400000)还可用于细胞渗透性的研究，如血脑屏障通透性以及血脑屏障破坏程度的测定。

 

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　　生物活性

 

　　指南（以下是我们推荐的程序。此程序只提供一种指导，应根据您的特定需求进行修改）。

 

　　细胞标记:

 

　　适用于正在发生凋亡的HeLa细胞和人外周血单个核细胞(PBMC)(活的HeLa和PBMC不被FITC-Dextran染色)。

 

　　1.43.5°C孵育1 h，37°C孵育8 h，诱导细胞凋亡。

 

　　2.将细胞悬浮在100μL的培养基中，在Q-prep管与10μL的propidium iodide(PI)，10μL的FITC-Dextran(MW 40000)混合，PI和FITC-Dextran(MW 40000)的最终浓度分别为7.5μM和1.13μM。

 

　　3.将细胞在室温黑暗条件下培养25分钟。

 

　　4.取3 mL培养基的标记细胞，500 g离心10分钟。

 

　　5.取离心细胞，加入1 mL培养基，用流式细胞术或荧光显微镜分析(PI:Ex=500 nm,Em=600 nm;FITC-Dextran(MW 40000):Ex=495 nm,Em=525 nm)。

 

　　细胞旁渗透性检测

 

　　1.在transwell室的基础培养基中加入FITC-Dextran(0.1 mg/mL)。

 

　　2.在15分钟后从transwell插入器中收集培养基。

 

　　3.测量荧光信号(Ex=485 nm,Em=538 nm)。

 

　　4.根据荧光强度计算FITC-Dextran浓度。

 

　　5.计算渗透率。

 

　　体内研究

 

　　Guidelines(Following is our recommended protocol.This protocol only provides a guideline,and should be modified according to your specific needs).

 

　　肠屏障功能测定

 

　　1.小鼠饥饿处理4小时。

 

　　2.FITC-Dextran MW 40000灌胃小鼠(0.6 mg/g)。

 

　　3.在4 h内测量荧光强度(Ex nm/Em 520 nm)。

 

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