Pilocarpine Hydrochloride盐酸毛果芸香碱

　　Pilocarpine Hydrochloride 是一种有效的 M3 型毒蕈碱乙酰胆碱受体 (M3 muscarinic receptor) 激动剂。

 

　　MCE 的所有产品仅用作科学研究或药证申报，我们不为任何个人用途提供产品和服务

 

　　生物活性

 

　　体外研究

 

　　为了评估Pilocarpine Hydrochloride盐酸毛果芸香碱的细胞毒性，通过光学显微镜观察人角膜基质（HCS）细胞的形态，并利用MTT测定法评估细胞的活力。形态学观察显示，暴露在浓度为0.625至20 g/L的Pilocarpine Hydrochloride盐酸毛果芸香碱中的HCS细胞，呈剂量和时间依赖的增殖抑制和形态异常，如细胞萎缩、胞质空泡化、与培养基质脱离接触以及最终死亡，而暴露在浓度低于0.625g/L的Pilocarpine Hydrochloride盐酸毛果芸香碱下的细胞与对照组之间没有明显差异。MTT测定结果显示，在暴露在浓度高于0.625 g/L的Pilocarpine Hydrochloride盐酸毛果芸香碱后，HCS细胞的存活率随着时间和浓度的增加而降低（P <0.01或0.05），而暴露在浓度低于0.625 g/L的Pilocarpine Hydrochloride盐酸毛果芸香碱下处理的HCS细胞与对照组相比没有明显差异。在使用Phenylephrine（10至200 nM）收缩的大鼠尾动脉分离段中，部分胆碱能激动剂Pilocarpine Hydrochloride盐酸毛果芸香碱引发浓度依赖性的舒张反应，其EC50为2.4 mM。

 

　　体内研究

 

　　检查了对照组大鼠（CN）和运动组大鼠（EX）中Pilocarpine Hydrochloride盐酸毛果芸香碱诱导的唾液分泌。结果显示，与对照组相比，运动组大鼠在Pilocarpine Hydrochloride盐酸毛果芸香碱刺激下产生了显著更多的唾液（P <0.01）。相反，运动组大鼠的唾液中Na+浓度显著低于对照组（P <0.05）。

 

　　MCE未独立确认这些方法的准确性。仅供参考。

 

　　实验参考方法

 

　　细胞检测

 

　　细胞活力通过MTT检测法进行测定。简要来说，将HCS细胞接种到96孔培养板（Nunc）中，每孔密度为1×104个细胞/100 µL，然后进行培养和处理。在间隔4小时的时间内，完全用含有1.0 g/L MTT的无血清DMEM/F12培养基替换含有Pilocarpine Hydrochloride盐酸毛果芸香碱（0.625至20 g/L）的培养基，并在37°C黑暗环境中孵育4小时。小心丢弃含MTT的培养基后，加入150 µL二甲基亚砜（DMSO）溶解产生的偶氮甲烷结晶，在37°C黑暗环境中孵育15分钟，然后使用Multiskan GO微孔读数器测量490 nm处的吸光度。

 

　　动物实验

 

　　大鼠实验：

 

　　10周龄的雄性Wistar大鼠分为两组，运动组（EX，n=6）和对照组（CN，n=6）。EX组的大鼠在装有跑步轮（SN-451）的笼子中自愿进行运动，而CN组的大鼠则被放置在带有锁定跑步轮的笼子中。在第40天进行Pilocarpine Hydrochloride盐酸毛果芸香碱诱导唾液分泌的测量。简要来说，将大鼠麻醉后，在其舌下放置预称重的棉球，并通过腹腔注射Pilocarpine Hydrochloride盐酸毛果芸香碱（0.5 mg/kg）诱导唾液分泌。然后每10分钟更换一次棉球，持续1小时。之后再次称量收集到的棉球，并通过减去初始质量来计算分泌的唾液质量。