GW3965是LXR激动剂

    GW3965是LXR激动剂，对hLXRα和hLXRβ的EC50分别为190和30 nM

    GW3965的生物活性

    体外

    GW3965在体外促进GBM细胞死亡，在表达EGFRvIII的肿瘤细胞中具有增强的功效。 GW3965上调胆固醇转运蛋白基因ABCA1和E3泛素连接酶IDOL的表达并降低LDLR水平。 LXR配体抑制由胶原蛋白或CRP刺激的血小板聚集和钙动员。 当用1μg/ mL CRP刺激血小板时，GW3965（1或5μM）对纤维蛋白原结合和P-选择蛋白暴露显示出轻微的抑制作用。 但是使用更高浓度的GW3965（10μM）或T0901317（40μM），血小板表面的纤维蛋白原和P-选择素水平降低。

    体内

    GW3965诱导STZ大鼠的脊髓，小脑和大脑皮质中的神经活性类固醇的增加，但非病理动物的CNS中没有。 GW3965治疗诱导糖尿病动物脊髓中二氢孕酮的增加与髓鞘碱性蛋白表达的增加有关。 GW3965（40mg / kg，口服）强烈诱导ABCA1表达并降低LDLR表达，这伴随着59％的肿瘤生长抑制，以及体内GBM细胞凋亡增加25倍。 GW3965（2mg / kg，i.v。）增加出血时间并调节体内血小板血栓形成

    实验参考方法

    细胞分析

    将细胞接种在96孔中，24小时后用每个实验中指示的不同药物在含有1％FBS或脂蛋白缺乏的血清的培养基中处理。 使用Cell Proliferation Assay Kit测定相对增殖。 在5℃下加入四唑盐WST-1 [2-（4-碘苯基）-3-（4-硝基苯基）-5-（2,4-二磺基 - 苯基）-2H-四唑盐，单钠盐]后，将细胞培养1.5小时 使用酶标仪在420-480nm下测量％CO2,37℃和处理和未处理细胞的吸光度。 使用血细胞计数器对接种在12孔板中的细胞进行计数，并使用台盼蓝排除测定法评估死细胞。

    MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。

    动物实验研究

    通过单次i.p.在2个月大的雄性大鼠中诱导糖尿病。 将新鲜制备的STZ（65mg / kg）注入0.09M柠檬酸盐缓冲液（pH4.8）中。 对照动物注射pH4.8的0.09mol / L柠檬酸盐缓冲液。 通过使用血糖仪OneTouch Ultra2测量尾静脉血糖水平，在链脲佐菌素注射后48小时确认高血糖。 只有平均血浆葡萄糖水平超过300 mg / mL的动物才被归类为糖尿病患者。 在用Ro5-4864或GW3965治疗之前和死亡之前也评估血糖。 STZ注射后两个月，糖尿病动物每周一次用Ro5-4864（3mg / kg）或GW3965（50mg / kg）治疗。 因此，他们在一个月内接受四次皮下注射。 对照糖尿病大鼠接受200μL载体（芝麻油）。 按照相同的实验时间表，用Ro5-4864，GW3965或载体注射4个月大的非糖尿病雄性大鼠。 在最后一次治疗后24小时杀死大鼠。