细胞转染实验

　　过完春节回来，有不少小伙伴跟小 M 抱怨细胞转染实验太难了，天天泡在实验室，一会担心细胞死了，一会担心核酸没转进去，愁眉苦脸，寝食难安，春节好不容易长得肉都掉没了…

 

　　小 M 敲黑板！！朋友们，是不是忘了年前我们分享的实验宝典了！不都告诉你们细胞转染的一大法宝了吗！赶紧搬好小板凳跟着我一起复习一下。

 

　　细胞转染实验是生物学实验中较为基础的实验，主要指将 DNA/RNA 导入真核细胞。细胞转染方法五花八门，常见的可分为化学法、物理法和病毒法。

 

　　先前小 M 已经介绍过各种转染方法的优缺点了 （见 “六合心法” 有三式~），在传统的转染方法 （如磷酸钙法、电穿孔法、病毒法等） 转染效率低、细胞毒性大、重复性差的情况下，以 Lipo3000 为主的阳离子脂质体转染试剂脱颖而出，一度成为转染界的“热门选手”。但是它贵啊！稍一不慎，人财两空，哦不，是细胞和试剂都没了，岂是一个惨字了得。

 

　　

 

　　图 1. 常见转染技术原理

 

　　想要高效又价美的转染试剂吗？

 

　　MCE 重磅推出的性价比之王图片 PolyFast Transfection Reagent（HY-K1014），宿主范围广、转染效率高、细胞毒性小，最最最关键的是价格只有 Lipo3000 五分之一！！！Lipo3000 五分之一！！！Lipo3000 五分之一！！！嘿嘿，重要的事情说三遍。

 

　　

 

　　图 2. 细胞转染步骤

 

　　小白： PolyFast Transfection Reagent 也是属于阳离子脂质体转染试剂吗？

 

　　小M: 不是哦！PolyFast Transfection Reagent 属于阳离子聚合物转染试剂，在确保高转染效率的同时，对细胞毒性更小！

 

　　小白： 那可以使用有血清的培养基吗？

 

　　小M: 可以使用有血清的培养基图片。但对于一些难转染细胞，建议刚开始转染前使用无血清培养基，至少转染一小时后再换成有血清培养基。

 

　　小白： 那培养基中含有抗生素会对细胞转染有影响吗？

 

　　小M: 可添加抗生素。但是为了提高转染效率，建议刚开始转染前使用无抗生素培养基，后续可根据具体的实验体系添加相应抗生素。

 

　　小白： 那在具体的操作过程中，DNA 和 PolyFast Transfection Reagent 的比例是多少呢？

 

　　小M: 我们推荐的 DNA （μg） 和 PolyFast Transfection Reagent （μL） 的用量比例为 1:3。如有必要，可在 1:1-1:5 的范围内调整以优化转染效果。最佳转染条件因不同的细胞类型和培养条件而有所区别，转染前，可做预实验摸索最佳转染比例。

 

　　小M: 此外，除了转染质粒 DNA，我们的转染试剂也适用于 RNA 转染

 

　　小白： 那可以同时转染两个质粒吗？

 

　　小M: 当然也可以啦！共转的话，建议总 DNA 及 PolyFast Transfection Reagent 的用量同步提高两倍，再根据具体的实验结果摸索两个质粒的使用比例。

 

　　小M: 就是如此优秀，小 M 带大家一起来看下我们的测试数据吧。

 

　　宿主范围广

 

　　MCE PolyFast Transfection Reagent 对多种常见细胞具有高水平转染效率，也可转染一些原代细胞和难转染细胞。

 

　　下表列举了本产品适用的部分细胞系。

 

　　

 

　　图 3. 适用细胞系

转染效率高

 

　　图 4. HEK293 细胞中和 BHK-21 细胞中转染效率比较

 

　　细胞毒性小

 

　　图 5. 转染效率比较和细胞活力测定

 

　　左：293 T 细胞，pcDNA3-C-REP 质粒 （2.5 μg）；PolyFast Transfection Reagent （7.5 μL）；右：Huh-7 细胞活力测定

 

　　看了这么多，是不是心动啦？有了 MCE PolyFast Transfection Reagent，老板再也不用担心我做不好细胞转染实验啦！

 

　　现在上官网还可以申请试用装哦，数量有限，先到先得，速来围观~~