Coppersensor 1荧光染料

　　Coppersensor-1 (CS1) 是一种膜透性荧光染料。Coppersensor-1 对 Cu+ (一价铜离子) 具有亲和力，其亲和力在皮摩尔范围，对竞争细胞金属离子具有很高的选择性。Coppersensor-1 作为探针，可以选择性、灵敏地检测包括活细胞在内的生物样品中的铜 (I) 离子 (Cu+)。Coppersensor-1 可用于癌症、心血管疾病、神经系统疾病等严重疾病的成像研究。

 

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　　生物活性

 

　　指南（以下是我们推荐的方案。该方案仅提供指南，应根据您的具体需求进行修改）[1][2]。

 

　　A. 制备用于成像的试剂储备溶液：

 

　　1. 通过在每毫升 DMSO 溶剂中溶解 0.63 mg 固体 CS1，在 DMSO 中制备 1 mM CS1 储备溶液（MW 630 g/moL）。

 

　　B. 活细胞的 CS1 标记：

 

　　1. 细胞成像实验需要培养 1-2 天。根据您的正常方案孵育细胞。

 

　　2. 在成像前一天，将细胞传代并置于涂有聚-L-赖氨酸（50 μg/mL）的 18 mm 玻璃盖玻片上。用于成像的贴壁细胞生长至 50-80% 融合。

 

　　3. 从培养箱中取出细胞，将一个盖玻片转移到含有 3 mL PBS 缓冲液的 35 毫米培养皿中。

 

　　4. 向培养皿中加入 15 μL 1 mM CS1 原液，使染料最终浓度为 5 μM。充分混合。

 

　　（染料浓度越高，背景荧光水平越高）

 

　　5. 在 25 或 37℃ 的黑暗环境中孵育 5-20 分钟。

 

　　C. 对 CS1 标记细胞进行成像：

 

　　1. 在标准共聚焦显微镜下成像，激发波长为 543 nm。

 

　　（CS1 可以使用任何类型的荧光显微镜进行成像，包括落射荧光、共聚焦和多光子）

 

　　参考文献

 

　　[1]. Evan W Miller, et al. Preparation and use of Coppersensor-1, a synthetic fluorophore for live-cell copper imaging. Nat Protoc. 2006;1(2):824-7.

 

　　[2]. Li Zeng, et al. A selective turn-on fluorescent sensor for imaging copper in living cells. J Am Chem Soc. 2006 Jan 11;128(1):10-1.