DAPI dihydrochloride

　　DAPI dihydrochloride 是一种 DAPI 染料。DAPI 是一种能够与 DNA 强力结合的荧光染料。DAPI 结合双链 DNA 小沟的 A/T 碱基对（1 个 DAPI 分子可以占据 3 个碱基对的位置），而显使荧光强度放大约 20 倍。通过观测荧光强度，可以对 DNA 定量。DAPI 还可以透过完整的细胞膜，常被用于活细胞和固定细胞的染色。

 

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　　生物活性

 

　　体外研究

 

　　一般方案

 

　　1. DAPI dihydrochloride 工作液的制备

 

　　1.1 储备液的制备

 

　　将 1 mg DAPI dihydrochloride 溶解于 1 mL ddH2O 以获得 1 mg/mL 的储备液。

 

　　注意：建议将储备液储存在 -20°C 或 -80°C 避光条件下，避免反复冻融。

 

　　1.2 DAPI dihydrochloride 工作液的制备

 

　　用无血清细胞培养基或 PBS 稀释储备液，得到 1-10 μg/mL的工作液。

 

　　注意：请根据需要调整 DAPI dihydrochloride 工作液的浓度

 

　　2、细胞染色

 

　　2.1 悬浮细胞 (96 孔板)

 

　　a．在 4°C 下以 1000 g 离心 3-5 分钟，然后弃去上清液。PBS洗涤2次，每次5分钟。细胞密度为1×106/mL。

 

　　b．加入1 mL工作液，室温孵育3-10分钟。

 

　　c．4℃、400 g 离心 3-4 分钟，弃上清。

 

　　d．用 PBS 洗涤 2 次，每次 5 分钟。

 

　　e．用无血清细胞培养基或 PBS 重悬细胞。荧光显微镜或流式细胞术观察。

 

　　2.2 贴壁细胞

 

　　a．在无菌盖玻片上培养贴壁细胞。

 

　　b.从培养基上取下盖玻片并吸出多余的培养基。

 

　　c.加入100 μL工作液，轻摇使之完全覆盖细胞，室温孵育 3-10 分钟。

 

　　d．用培养基洗涤2次，每次 5 分钟。荧光显微镜或流式细胞仪观察。

 

　　保存：-20℃，1年。避光

 

　　注意事项 1、请根据实际情况调整 DAPI dihydrochloride 工作液的浓度。

 

　　2、本品仅供 R&D 使用，不用于药物、家庭或其他用途。

 

　　3. 为了您的安全和健康，请穿白大褂，戴一次性手套操作。