MitoSOX Red荧光探针
MitoSOX Red 是特异靶向线粒体的活细胞荧光探针,具有细胞膜渗透性。MitoSOX Red 进入线粒体后会被超氧化物氧化,而不会被其他 ROS 或 RNS 生成系统氧化。被氧化的 MitoSOX Red 随后与线粒体/细胞核内的核酸结合,产生强红色荧光。MitoSOX Red 可以作为荧光指示剂,特异性检测超氧化物。另外,超氧化物歧化酶 (Superoxide dismutase,SOD) 能够预防 MitoSOX Red 氧化。
激发/发射波长:510/580 nm。
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生物活性
使用方法
1.MitoSOX Red 工作液的配制
1.1 制备储存液
用 13 μL 无水 DMSO 稀释 50 μg MitoSOX Red 去配制 5 mM 的储备液。
注:MitoSOX Red 储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存。
1.2 工作液的配制
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液,配制成 1-10 μM 的 MitoSOX Red 工作液。
注:请根据实际情况调整 MitoSOX Red 工作液浓度,且现用现配。
2. 细胞染色(悬浮细胞)
2.1 离心收集细胞,加入 PBS 洗涤两次,每次 5 分钟。细胞密度在 1×106/mL。
2.2 加入 1 mL MitoSOX Red工作液,室温孵育 5-30 分钟。
2.3 400 g,离心 3-4 分钟,弃去上清。
2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次,每次 5 分钟。
2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后,使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
3. 细胞染色(贴壁细胞)
3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2 从培养基中移出盖玻片,吸除多余培养基。
3.3 加入 100 μL 染料工作液,轻轻晃动使其完全覆盖细胞,孵育 5-30 分钟。
3.4 吸去染料工作液,用培养基洗 2-3 次,每次 5 分钟,使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
保存条件
-20℃ 避光保存一年
注意事项
1. 请根据实际情况调整 MitoSOX Red 工作液浓度与孵育时间。
2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。