U0126抑制剂
2019-03-14 
MCE小分子
U0126是一种有效，非ATP竞争性的 MEK1 和 MEK2 抑制剂，IC50 分别为70 nM和60 nM。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
U0126的生物活性
体外
用U0126处理有效地降低了A549细胞中所有测试菌株的子代病毒滴度。 虽然nM浓度的U0126有效降低H1N1v和H5N1（MB1），但需要μM浓度的U0126来降低H5N1（GSB）和H7N7的病毒滴度。 U0126对H1N1v的EC50值在A549细胞中为1.2±0.4μM，在MDCKII细胞中为74.7±1.0μM[2]。胎牛血清（FCS）刺激的肝癌细胞（FAO）在S期显示出显着比例（32.62） U0126强烈降低S期细胞比例（9.92％），G0-G1期细胞比例增加，G2 / M期细胞比例增加[3]。
体内
每天用U0126（腹膜内注射，10.5mg / kg）处理小鼠。 在对照实验中，肿瘤大小在整个动力学中是恒定的或略微增加的。 相反，在所有U0126实验中，植入和早期肿瘤生长显着减少。 此外，注射后9天及之后，用U0126治疗的肿瘤体积减少60-70％[3]。 对大鼠进行120分钟的短暂大脑中动脉闭塞（tMCAO），然后在再灌注0和24小时用U0126（腹膜内注射，30mg / kg）处理。 用U0126治疗后，S6c的血管收缩明显减少[4]。
U0126的溶剂和溶解度
体外：
DMSO：≥49mg / mL（114.87 mM）
H2O：<0.1 mg / mL（不溶）
*“≥”表示可溶，但饱和度未知
体内：
1。逐个加入每种溶剂：10％DMSO 90％玉米油
溶解度：3.33 mg / mL（7.81 mM）; 暂停解决方案; 需要超声波和加热
2。逐个添加每种溶剂：2％DMS??O 40％PEG300 5％Tween-80 53％盐水
溶解度：≥1mg / mL（2.34 mM）; 明确解决方案
3。逐个添加每种溶剂：10％DMSO 40％PEG300 5％Tween-80 45％盐水
溶解度：≥3.33mg / mL（7.81 mM）; 明确解决方案
实验参考方法
U0126的细胞分析[2]
将A549和MDCK II细胞接种于96孔培养板中，密度为每孔8×104个细胞，含有10％热灭活的胎牛血清（FCS），100U / mL青霉素，100的最小必需培养基（MEM） mg / mL链霉素。 将细胞在37℃，5％CO 2下孵育过夜。 此后，用PBS洗涤细胞两次。 将含有不同浓度的U0126（0.001-1000μM）的MEM加入细胞中。 加入U0126后，将细胞在37℃和5％CO 2下再培养48小时。 然后，通过在4℃下用100μL4％多聚甲醛（PFA）温育30分钟来固定细胞。 在室温下加入100μL结晶紫30分钟染色活细胞。 染色后，洗涤板并干燥。 为了从活细胞中提取结晶紫，向每个孔中加入100μL的100％甲醇。 在室温下孵育30分钟后，用酶联免疫吸附测定（ELISA）读数器在OD = 490nm处测量消光。 计算用抗病毒化合物处理后细胞存活率的百分比[2]。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
小鼠[3]
使用无胸腺雌性裸鼠（SWISS，nu / nu）。 在注射之前，FI细胞用稳定的荧光染料分子，10μg/ mL的DiA在37℃标记5小时。 洗涤去除游离的DiA后，用胰蛋白酶处理细胞用于接种（U0126实验）或转染（RNAi实验）。 将胆管上皮细胞在指定的时间皮下注射到裸鼠的胫骨中。 在化学实验中，接种后3小时，通过腹膜内注射每天用U0126（10.5mg / kg）处理小鼠。 每天使用卡尺测量每个肿瘤的长度和宽度。 以下公式用于计算肿瘤体积=宽度2×长度/ 2。 在实验结束时杀死小鼠。 肿瘤立即在液氮中冷冻。
大鼠[4]
使用12周龄雌性Wistar大鼠（250至265g），基于先前对雄性大鼠的药物评估，在tMCAO后再灌注0和24小时时注射U0126（30mg / kg腹膜内）。 研究II中的动物施用U0126或载体，并在tMCAO后14天被杀死。 实验组分配随机化并对手术实验者不知情。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
MCE 的所有产品仅用作科学研究，我们不为任何个人用途提供产品和服务
U0126的生物活性
体外
用U0126处理有效地降低了A549细胞中所有测试菌株的子代病毒滴度。 虽然nM浓度的U0126有效降低H1N1v和H5N1（MB1），但需要μM浓度的U0126来降低H5N1（GSB）和H7N7的病毒滴度。 U0126对H1N1v的EC50值在A549细胞中为1.2±0.4μM，在MDCKII细胞中为74.7±1.0μM[2]。胎牛血清（FCS）刺激的肝癌细胞（FAO）在S期显示出显着比例（32.62） U0126强烈降低S期细胞比例（9.92％），G0-G1期细胞比例增加，G2 / M期细胞比例增加[3]。
体内
每天用U0126（腹膜内注射，10.5mg / kg）处理小鼠。 在对照实验中，肿瘤大小在整个动力学中是恒定的或略微增加的。 相反，在所有U0126实验中，植入和早期肿瘤生长显着减少。 此外，注射后9天及之后，用U0126治疗的肿瘤体积减少60-70％[3]。 对大鼠进行120分钟的短暂大脑中动脉闭塞（tMCAO），然后在再灌注0和24小时用U0126（腹膜内注射，30mg / kg）处理。 用U0126治疗后，S6c的血管收缩明显减少[4]。
U0126的溶剂和溶解度
体外：
DMSO：≥49mg / mL（114.87 mM）
H2O：<0.1 mg / mL（不溶）
*“≥”表示可溶，但饱和度未知
体内：
1。逐个加入每种溶剂：10％DMSO 90％玉米油
溶解度：3.33 mg / mL（7.81 mM）; 暂停解决方案; 需要超声波和加热
2。逐个添加每种溶剂：2％DMS??O 40％PEG300 5％Tween-80 53％盐水
溶解度：≥1mg / mL（2.34 mM）; 明确解决方案
3。逐个添加每种溶剂：10％DMSO 40％PEG300 5％Tween-80 45％盐水
溶解度：≥3.33mg / mL（7.81 mM）; 明确解决方案
实验参考方法
U0126的细胞分析[2]
将A549和MDCK II细胞接种于96孔培养板中，密度为每孔8×104个细胞，含有10％热灭活的胎牛血清（FCS），100U / mL青霉素，100的最小必需培养基（MEM） mg / mL链霉素。 将细胞在37℃，5％CO 2下孵育过夜。 此后，用PBS洗涤细胞两次。 将含有不同浓度的U0126（0.001-1000μM）的MEM加入细胞中。 加入U0126后，将细胞在37℃和5％CO 2下再培养48小时。 然后，通过在4℃下用100μL4％多聚甲醛（PFA）温育30分钟来固定细胞。 在室温下加入100μL结晶紫30分钟染色活细胞。 染色后，洗涤板并干燥。 为了从活细胞中提取结晶紫，向每个孔中加入100μL的100％甲醇。 在室温下孵育30分钟后，用酶联免疫吸附测定（ELISA）读数器在OD = 490nm处测量消光。 计算用抗病毒化合物处理后细胞存活率的百分比[2]。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
Animal Administration
小鼠[3]
使用无胸腺雌性裸鼠（SWISS，nu / nu）。 在注射之前，FI细胞用稳定的荧光染料分子，10μg/ mL的DiA在37℃标记5小时。 洗涤去除游离的DiA后，用胰蛋白酶处理细胞用于接种（U0126实验）或转染（RNAi实验）。 将胆管上皮细胞在指定的时间皮下注射到裸鼠的胫骨中。 在化学实验中，接种后3小时，通过腹膜内注射每天用U0126（10.5mg / kg）处理小鼠。 每天使用卡尺测量每个肿瘤的长度和宽度。 以下公式用于计算肿瘤体积=宽度2×长度/ 2。 在实验结束时杀死小鼠。 肿瘤立即在液氮中冷冻。
大鼠[4]
使用12周龄雌性Wistar大鼠（250至265g），基于先前对雄性大鼠的药物评估，在tMCAO后再灌注0和24小时时注射U0126（30mg / kg腹膜内）。 研究II中的动物施用U0126或载体，并在tMCAO后14天被杀死。 实验组分配随机化并对手术实验者不知情。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。 它们仅供参考。
