Mitoquinone mesylate
Mitoquinone mesylate是一种基于TPP的线粒体靶向抗氧化剂,可防止氧化损伤。
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生物活性
体外
线粒体抗氧化剂Mitoquinone(MitoQ)是针对线粒体的抗氧化剂.Mittoquinone(MitoQ)和DecylTPP治疗的最佳剂量是从4小时冷藏(CS)期间的剂量反应实验中选择的。最初使用线粒体靶向的荧光染料MitoSOX Red(可测量线粒体超氧化物的生成)测试线粒体对CS损伤的潜在保护作用。与未经处理的细胞相比,暴露于CS的正常大鼠肾脏(NRK)细胞由于线粒体超氧化物导致的荧光增加了约2倍。线粒体对CS诱导的线粒体超氧化物生成具有显着的保护作用。而对照化合物DecylTPP不提供任何保护。线粒体处理显着降低了线粒体超氧化物的产生
体内
线粒体(MitoQ)处理可显着减少胰腺水肿和中性粒细胞浸润。MitoQ剂量依赖性地增加血清淀粉酶,在较高剂量下大约增加一倍。MitoQ治疗使Caerulein诱导的肺MPO活性几乎翻倍,并且血清IL-6水平也显着增加(在1 mg / kg剂量下,剂量1)
溶剂与溶解度
体内:
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案,配制前请先配制澄清的储备液,再依次添加助溶剂 (为保证实验结果的可靠性,体内实验的工作也建议您现用现配,当天使用;澄清的储备液可以根据储存条件,适当保存;以下溶剂前的百分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比):
1.请依序添加每种溶剂: 10% DMSO 》40%PEG300 》5%吐温80 》生理盐水45%
溶解度:≥2.5 mg / mL(3.68 mM); 清晰的解决方案
2.请依序添加每种溶剂: 10% DMSO 》90%(盐水中20%SBE-β-CD)
溶解度:2.5 mg / mL(3.68 mM); 悬浮溶液;需要超声波
3.请依序添加每种溶剂: 10% DMSO 》90%玉米油
溶解度:2.5 mg / mL(3.68 mM); 沉淀溶液;需要超声波
*以上所有助溶剂都可在 MCE 网站选购。
实验参考方法
细胞分析
正常大鼠肾近端肾小管细胞(NRK-52E)置于六孔100或150mm或150mm平板中,置于37°C含5 %CO 2和95%空气的加湿培养箱中,在含有5个DMEM的DMEM中胎牛血清百分比(FCS)。细胞生长到60%汇合,分为四个处理组:1)未经处理(Untx),2)CS,3)CS + Mitoquinone(MitoQ)和4)CS + DecylTPP。未经处理的细胞在含有5%FCS的DMEM中保持在37°C(第1组)。通过用冷PBS洗涤细胞两次并将它们分别存储在UW / Viaspan溶液中(在4°C下4 h)(第2组),CS + Mitoquinone(1μM)(第3组)或CS + DecylTPP(1进行)来启动CS。 μM)(第4组)。在单独的实验中,通过用含有5%FCS的DMEM代替单独的UW溶液或含有Mitoquinone或DecylTPP的UW溶液过夜,使细胞暴露于CS加RW(在37°C下18 h)
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。
Animal Administration
老鼠
使用雄性CD1小鼠(30-35 g)或C57BL / 6J小鼠(20-25 g)。每小时进行7次腹膜内注射,最大剂量(50μg/ kg)的Caerulein,CCK-8类似物,以诱导过度刺激性急性胰腺炎(CER-AP)。对照小鼠接受等体积的PBS注射。在Mitoquinone治疗组中,第一次和第三次注射Caerulein时,分别以10 mg / kg(剂量1)或25 mg / kg(剂量2)给予Mitoquinone。同样,dTPP治疗组的dTPP剂量为9.6 mg / kg(剂量1)或24 mg / kg(剂量2)。剂量1和2的线粒体醌和dTPP的摩尔浓度相同。在首次注射Caerulein后12 h处死小鼠以收集样品。胆汁酸诱导的AP是通过将TLCS逆行输注到胰管(TLCS-AP)中来实现的。麻醉后 使用微型输液泵以5μL/ min的速度施加TLCS 10分钟。胰腺头部出现弥漫性浅蓝色(亚甲蓝),表明已成功将TLCS注入胰腺。对照小鼠接受无TLCS输注的假手术。在治疗组中,在输注TLCS后1小时和3小时给予Mitoquinone(10 mg / kg)或dTPP(9.6 mg / kg)。在TLCS输注或假手术后24小时处死小鼠。
MCE尚未独立确认这些方法的准确性。它们仅供参考。