胰蛋白酶-EDTA (0.25%)含酚红

　　MCE 0.25% Trypsin-EDTA (1x), phenol red 胰蛋白酶-EDTA (0.25%)含酚红由胰蛋白酶干粉与 EDTA 混合溶解而成，可广泛应用于细胞解离、常规细胞培养传代及原代组织解离，使组织或贴壁细胞分散成单个细胞。

 

　　MCE 0.25% Trypsin-EDTA (1x), phenol red 胰蛋白酶-EDTA (0.25%)含酚红 由胰蛋白酶干粉 (来自猪胰腺的蛋白酶混合物，经辐照灭菌) 与 EDTA 混合溶解而成。胰蛋白酶 (Trypsin) 具有很强的消化能力，可广泛应用于细胞解离、常规细胞培养传代及原代组织解离，其功能主要是使细胞间的蛋白质水解，使组织或贴壁细胞分散成单个细胞。

 

　　操作流程

 

　　贴壁细胞的消化

 

　　1. 吸去培养液，用无菌的 PBS、Hanks 或无血清培养液洗涤细胞两次，以去除残余血清。

 

　　2. 加入少量预热的胰蛋白酶-EDTA 消化液，以能覆盖细胞为宜，室温孵育约 2 分钟。实际孵育时间因所使用的细胞系而异。

 

　　3. 显微镜下观察，当 ≥ 90% 的细胞脱落时，加入两倍体积的含血清的完全培养基，终止消化。

 

　　4. 200× g 离心 5-10 分钟，将细胞沉淀重悬于含血清的完全培养基中以进行后续实验。

 

　　组织的消化

 

　　不同组织所需要的消化时间相差很大，请依据经验和相关文献确定最佳条件。