FCCP线粒体解偶联剂的使用方法

　　碳酰氰-4-三氟甲氧基苯腙 FCCP 是线粒体中氧化磷酸化 (OXPHOS) 解偶联剂。FCCP 诱导 PINK1 激活，促进 Parkin 在 Ser65 位点磷酸化。

 

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　　FCCP中文名称：碳酰氰-4-三氟甲氧基苯腙

 

　　生物活性

 

　　体外研究

 

　　FCCP (5 μM) 导致 K695sw 细胞中 Aβ 和 APPsβ 产生的浓度依赖性降低。FCCP 抑制野生型 APP 的加工。FCCP 不会改变任何测量浓度细胞的 ATP 水平。FCCP 对 APP 分解代谢的影响独立于对氧化磷酸化的二次影响或 K695sw 细胞中细胞活力降低的结果。FCCP (5 μM 或 500 nM)、baf A1 和 NH4Cl 诱导 K695 细胞中 Tf-Tx 和 Tf-F 细胞荧光的变化[1]。

 

　　碳酰氰-4-三氟甲氧基苯腙 FCCP (200 nM) 在短期体外培养过程中保护和增强猫卵巢组织中的卵泡完整性。但 FCCP 似乎不会在卵巢组织冷冻保存过程中发挥有益或有害的作用[2]。相关产品推荐：CCCP氧化磷酸化解偶联剂

 

　　实验参考方法

 

　　细胞测定[1]

 

　　K695sw 细胞在96孔板中以每孔20,000个细胞的密度培养，并暴露于车辆或不同浓度的FCCP，其他步骤与上述相同。接种后24小时，细胞在补充有丙酮酸钠（1 mM）的杜尔贝克修饰的鹰培养基中接受各种处理。在药物暴露的同时，每个孔中加入YO-PRO（4 μM），并使用 Cytofluor 2350 荧光读板机在37°C下每30分钟对其摄取进行量化，持续1天。作为阳性对照，实验结束时所有孔均暴露于0.1% Triton X-100[1]。

 

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　　参考文献

 

　　[1]. Connop BP et al.Novel effects of FCCP [carbonyl cyanide p-(trifluoromethoxy)phenylhydrazone] on amyloid precursor protein processing. J Neurochem. 1999 Apr;72(4):1457-65.  

 

　　[2]. Tanpradit N, et al. Carbonyl cyanide 4-(trifluoromethoxy)phenylhydrazone (FCCP) pre-exposure ensures follicle integrity during in vitro culture of ovarian tissue but not during cryopreservation in the domestic cat model. J Assist Reprod Genet. 2016 Dec;33(12):1621-1631. Epub 2016 Sep 17.