Cyanine5.5 amine荧光染料
Cyanine5.5 amine (Cy 5.5 amine),Cy5.5 类似物,是一种近红外 (NIR) 荧光染料 (Ex=648 nm,Em=710 nm)。Cyanine5.5 amine 可用于制备 Cy5.5 标记的纳米颗粒,从而得以用共聚焦显微镜进行跟踪和成像,且荧光背景低。
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生物活性
体内研究
实时监测标记有Cy5.5的聚乳酸-聚乙二醇共聚物纳米颗粒(Cy5.5-PLGA)在视网膜血管中的情况。
操作指南(以下是我们推荐的步骤。此步骤仅供参考,应根据您的具体需求进行修改)。
1、新鲜制备Cy5.5-PLGA悬浮液(悬浮于0.5 mL 1%聚氧乙烯-188,轻轻涡旋,并在常温下静置30分钟后使用),通过静脉注射给予大鼠(0.5 mL)。
2、麻醉大鼠,使用Neosynephrine-POS 5%处理眼睛以放松虹膜,并在眼睛上涂抹Vidisic眼霜以防止眼睛干燥,并用作接触镜的浸泡介质。
3、将大鼠固定在共聚焦显微镜下,使眼睛位于目镜下的工作距离之下,向尾静脉插入导管。
4、观察视网膜中的荧光,并在不同的时间点(0、1、3、5、15、30、60、90分钟)捕获图像。 注意:在整个体内实时成像过程中,大鼠应放置在加热板上。
5、在体内实时成像后,使用过量的上述麻醉剂安乐死大鼠,并将眼球取出并放入冷却的HEPES缓冲液中(135 mM NaCl,5 mM NaOH,2.5 mM KCl,7 mM MgCl2,10 mM HEPES,10 mM glucose;pH 7.4)。
6、移除眼部前节和玻璃体,小心地分离整个视网膜,平铺在改良的培养皿上。
7、使用0.1 mg/mL Hoechst 33342(HY-15559)在HEPES溶液中孵育整片视网膜,进行20分钟的核染色。产品推荐:FITC中文名称异硫氰酸荧光素酯
8、使用4%戊二醛溶液固定平铺视网膜,处理20分钟后用HEPES溶液洗涤。
9、在制备平铺视网膜后立即使用显微镜捕获图像。
MCE未独立确认这些方法的准确性。仅供参考。